【摘 要】
：
目的:乌头汤始载于《金匮要略》,临床应用已有千年之久。具有良好的抗炎,治疗类风湿性关节炎等功效。原方记载麻黄、芍药、黄芪各三两,川乌五枚（口父咀,以蜜二升,煎取一升,即出乌头）,右五味,口父咀四味,以水三升,煎取一升,去渣,纳蜜煎中,更煎之。由此可见,其乌头汤的制法与近代略有不同。为探究蜂蜜对乌头汤的影响,本实验采用UPLC-MS/MS技术,对乌头汤的体内吸收,化学成分以及体内代谢进行综合分析。为
论文部分内容阅读
目的:乌头汤始载于《金匮要略》,临床应用已有千年之久。具有良好的抗炎,治疗类风湿性关节炎等功效。原方记载麻黄、芍药、黄芪各三两,川乌五枚（口父咀,以蜜二升,煎取一升,即出乌头）,右五味,口父咀四味,以水三升,煎取一升,去渣,纳蜜煎中,更煎之。由此可见,其乌头汤的制法与近代略有不同。为探究蜂蜜对乌头汤的影响,本实验采用UPLC-MS/MS技术,对乌头汤的体内吸收,化学成分以及体内代谢进行综合分析。为原方配伍的科学性提供理论依据。方法:1采用HPLC法,流动相10 mmol/L磷酸二氢铵,磷酸调p H 2.1-乙腈,色谱柱Waters XSelect C18（4.6×250 mm,5μm）,检测波长210 nm,235 nm,柱温35℃,流速1 m L/min。以麻黄碱,伪麻黄碱,芍药苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,甘草苷,苯甲酰新乌头碱,苯甲酰次乌头碱,苯甲酰乌头碱,甘草酸和干膏率为评价指标。采用层次分析法（AHP）-熵权法混合加权法确定权重系数。以提取时间,提取次数和料液比为考察因素,结合Box-Bohnken响应面法进行试验设计,并优化提取工艺参数。2开发一种快速灵敏的UPLC-MS/MS的方法,通过单次或连续口服给药,对大鼠血浆中麻黄碱,伪麻黄碱,甘草酸,甘草苷,芍药苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷和苯甲酰新乌头原碱等7种有效成分进行定量分析。3建立UPLC-Q-Exactive质谱方法,采用正、负离子模式对乌头汤中主要成分进行分析,使用Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱分离乌头汤的水提取物。以乙腈和0.1%甲酸水溶液（v/v）为流动相。基于10ppm误差范围内的精确质量和串联质谱数据,对其进行结构鉴定。对鉴定成分进行多元统计分析。4将24只SD大鼠,随机分为3组,即空白组（Control）、乌头汤组（WTD）、加蜜乌头汤组（WTDH）、每组8只。按生药量计算,分别口服给药乌头汤（8.4g/kg）,加蜜乌头汤（8.4g/kg）,空白组给予等量生理盐水。连续给药14天,末次给药后禁食12h采集血浆,进行代谢组学分析。结果:1该HPLC方法下,各物质间分离度良好,与阴性对照品相比较均无干扰,符合方法学考察中各项指标要求。乌头汤的最佳提取工艺为提取2h,提取2次,料液比为1:14,采用优化后最佳工艺进行验证,与预测值相比RSD＜3%。2药代动力学参数结果显示,通过比较Cmax,CL/F,AUC0-t和AUC0-∞,除了麻黄碱和伪麻黄碱以外,加蜜组相较于不加蜜组有显著提高。3在乌头汤中鉴定或初步表征了75种成分,包括生物碱、单萜苷、三萜皂苷、黄酮和黄酮苷。并对所以化合物来源进行指认。通过主成分分析,火山图以及热图显示,证明蜂蜜对乌头汤化学成分的影响并不显著。4基于代谢组学技术,采用多元变量统计方法,对乌头汤和加蜜乌头汤对大鼠血浆代谢进行研究。与空白组相比,乌头汤和加蜜乌头汤的差异代谢物分别为50个和66个,共有差异代谢物为30个。并对其代谢物相关通路进行分析发现,加蜜乌头汤涉及的代谢通路更为广泛,这表明蜂蜜对乌头汤的体内代谢影响更为广泛。结论:该HPLC方法可有效分离乌头汤中12种不同结构类型成分,稳定高效,操作简便,结果准确可作为乌头汤有效成分的含量测定方法。与此同时将乌头碱、次乌头碱和新乌头碱等毒性成分一并纳入检测范围,确保用药安全。优选的提取工艺参数稳定,可靠且准确,重复性良好,可为今后乌头汤新药开发及生产提供理论基础。药代动力学研究发现,蜂蜜能促进乌头汤中有效成分在大鼠体内的吸收,提高生物利用度。而通过对乌头汤中化学成分进行定性及多元统计分析发现,蜂蜜的加入并未对乌头汤中的主要化学成分的溶出产生影响,因此推测影响体内吸收的原因并非源于所含成分含量差异所导致。通过代谢组学的研究显示,蜂蜜的引入致使乌头汤对大鼠体内内源性代谢物及代谢途径均有不同程度的改变,除共有代谢物及代谢途径如葵烯二酸或花生酸代谢等途径外,加蜜乌头汤组还参与如亚油酸等代谢途径。其对降低血液胆固醇,预防动脉粥样硬化起到一定作用。因此推测蜂蜜的引入可能导致更多的代谢途径参与到机体的调控中来,且对于保护机体等方面可能效果更佳显著。上述结论为蜂蜜对乌头汤的减毒增效以及原方配伍的科学性和合理性提供理论依据。
其他文献
针对可再生能源、新型电力电子设备应用及需求侧响应等因素对新型电力系统的影响，笔者探讨了新型电力系统的特征、保供面临的挑战以及应对措施，从电源结构、电网形态、技术、体制机制等方面分析了新型电力系统多维度的特征，研判梳理了新型电力系统在规划、运行、市场方面所面临的挑战，并提出构建新型电力系统的发展路径。该研究成果可为新型电力系统的后续相关研究提供参考。
目的:通过对临床脑血管性疾病病例进行收集,从中识别出血管性轻度认知损害（Vascular mild cognitive impairment,VaMCI）人群,对该病危险因素及中医证候特征与认知功能相关性进行客观分析;采用补肾益髓解毒法对VaMCI患者进行临床观察,为该法提供直观量化的临床应用依据;同时基于网络药理学分子水平探究补肾益髓解毒法治疗VaMCI的潜在活性成分及起效的分子机制,进一步探讨
目的:评价基于“一则八法”的杞地消渴肾衰安汤联合保留灌肠治疗消渴肾衰（肝肾虚损兼湿浊瘀毒证）的临床疗效,初步探讨其肾脏保护作用,丰富“毒损肾络,邪伏膜原”理论的科学内涵,为临床治疗消渴肾衰提供新思路。方法:1.收集长春中医药大学附属医院内分泌代谢病科门诊及疗区消渴肾衰（肝肾虚损兼湿浊瘀毒证）病例64例,用随机数表法分为两组,治疗组、对照组各32例。治疗组口服杞地消渴肾衰安汤、排毒汤灌肠、配合“一则
目的:利用蛋白质组学技术对绝经后骨质疏松症的血清差异蛋白进行筛选,以研究绝经后骨质疏松症的分子机制;利用网络药理学和分子对接技术预测鹿茸治疗绝经后骨质疏松症的潜在作用机制;研究鹿茸提取物干预绝经后骨质疏松症模型小鼠的生物学机制。方法:1.从长春中医药大学附属医院收集绝经后骨密度正常人群和绝经后骨质疏松症患者血清各12例,每组中随机选取4个样本进行蛋白质组学分析,去除样本高丰度蛋白,获得样本低丰度蛋
第一章补肾健脾、解毒利咽法对IgA分泌细胞分布及IgA表达的影响目的:在中医“喉肾相关”理论的指导下,以IgA分泌细胞为研究主线,探讨补肾健脾、解毒利咽法治疗IgA肾病的作用机制。方法:1.随机将SD雄性大鼠140只分为空白组（Control组）20只,造模组120只,黏膜免疫建模法制备IgA肾病动物模型;随机分为模型组（Model组）,补肾利咽方高剂量组（BSLY-H组）、补肾利咽方中剂量组（B
目的:本研究通过临床观察,以验证散结通脉方对颈动脉粥样硬化（CAS）患者疗效确切,为CAS的防治提供新的思路和方法;通过动物实验,以阐明散结通脉方干预CAS的内在机制,为临床提供实验依据。方法:1.临床观察本研究收集符合纳入标准的CAS患者72例,按随机原则分为治疗组和对照组,对照组给予阿托伐他汀钙片治疗,治疗组在给予阿托伐他汀钙片的基础加用散结通脉方。经连续12周的干预后,分别评估两组患者的中医
师德只有在日常生活中培育，才能真正作用于教师，才能彰显其意义与价值，从而提升教师的职业道德。日常生活与师德培育之间有着内在关联性，日常生活是进行师德培育的根基与场域，而师德培育能指导教师日常生活中的个体行为与交往活动。在日常生活中进行师德培育是内化与外化交互作用的过程，这一过程以教师日常生活的构成逻辑为生成根基，经历从理性认知到情感共鸣再到实践自觉的发展，最终形成以日常师德规范为参照的认知培育、情
目的:评估“固本培元”揿针法对近视早期患者的临床观察,并通过实验研究观察豚鼠巩膜组织样本中与近视相关差异蛋白及相关通路改变的结果,初步阐释“固本培元”揿针法治疗近视早期的生物学效应机制。方法:临床试验研究1.健康受试者基线期评估;2.“固本培元”揿针法对近视早期患者相关指标的影响。效应机制研究通过应用“Label-free”蛋白质组学技术筛选已经取得的巩膜样本,并鉴定其中的差异蛋白,运用KEGG、
＜正＞新华社北京3月31日电4月1日出版的第7期《求是》杂志将发表中共中央总书记、国家主席、中央军委主席习近平的重要文章《在中央党校建校90周年庆祝大会暨2023年春季学期开学典礼上的讲话》。文章强调,回顾历史,党校始终不变的初心就是为党育才、为党献策。新时代新征程,各级党校要坚守这个初心,锐意进取、奋发有为,为全面建设社会主义现代化国家、全面推进中华民族伟大复兴作出新的贡献。