大鼠周围神经端侧吻合的实验研究

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采用SD大鼠腓神经与胜神经端侧吻合的模型,将胫神经一侧去除部分外膜,腓神经切断后远端行外膜吻合于胫神经侧面,观察再生轴突的形态和功能,探讨神经侧支发芽的分子机制以及外源性NGF对侧支发芽的作用。 应用组织HE染色、透射电镜、电生理、HRP逆行追踪方法,观察再生轴突的形态和功能,以及再生轴突中感觉和运动纤维的差异;应用免疫组织化学方法结合计算机图像分析,观察 NGF,CNTF和 S-100蛋白在神经侧支发芽中的表达:应用HRP逆行追踪、免疫组织化学法、放射化学检查法,观察外源性NGP在端侧吻合术后对损伤神经元的保护和对GAP-43和ChAT的调控。 实验表明:1.端侧吻合术后,供体神经可以通过侧支发芽方式使再生轴突进入远端神经。供体神经吻合远端神经结构和功能正常,提示未对供体神经造成损伤。2.在脊髓和脊神经节均可见到HRP标记细胞,说明再生神经纤维中,感觉纤维和运动纤维兼而有之。再生的运动轴突和感觉轴突起源于坐骨神经的脊髓和脊神经节相应节段。端侧吻合与端端吻合比较再生轴突中感觉纤维再生比例相对较高。3.神经端侧吻合后,远端神经NGF表达迅速上调,近端未见增强;CNTF表达在神经远端随时间推移出现先下降后上调的趋势,提示局部较高浓度的神经营养因子和趋化因子的存在可以促使完整的神经侧支发芽。S-100表达下调,有利于雪旺氏细胞的增殖和迁移,而未含雪旺氏细胞的硅胶管中未见再生轴突,显示远端神经雪旺氏细胞在轴突侧支发芽过程中起着极为重要的作用。4.本实验发现NGF对运动神经元也有保护作用,损伤后早期局部持续给予NGF,对神经元有保护作用,而以往多认为NGF主要作用于感觉神经元。神经损伤后,一些调控因子如GAP-43、ChAT等发生变化,NGP可以促使这些因子的表达上调,间接促进了神经纤维的再生,证实NGF可以促进神经侧支发芽。 一二一鳍一罩医大学 一建必要 日士学位论文一5.神经侧支发芽的机制仍有特于进一步研究。端侧吻合效果不如端端吻合,对临床而言,端端吻合仍应为首选的修复方式,当近端损毁严重或缺损较大时,端侧吻合应作为一种选择。
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