【摘 要】
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细菌外膜囊泡（outer membrane vesicles,OMVs）是细菌生命活动中产生的一种球形脂质双层纳米结构,具有多种功能如细菌-细菌、细菌-宿主之间的相互作用。OMVs是一种包含生物学活性物质的囊泡状复合体,具有独特的结构和丰富的抗原成分。研究表明OMVs是细菌转运毒力因子的重要途径,也是干扰宿主免疫防御系统的重要组成部分,在细菌感染中发挥重要作用。OMVs多样化的生理、病理功能,使其
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细菌外膜囊泡（outer membrane vesicles,OMVs）是细菌生命活动中产生的一种球形脂质双层纳米结构,具有多种功能如细菌-细菌、细菌-宿主之间的相互作用。OMVs是一种包含生物学活性物质的囊泡状复合体,具有独特的结构和丰富的抗原成分。研究表明OMVs是细菌转运毒力因子的重要途径,也是干扰宿主免疫防御系统的重要组成部分,在细菌感染中发挥重要作用。OMVs多样化的生理、病理功能,使其在生物医学和纳米技术等方面具有广阔的前景。因此,OMVs的快速有效分离提取对生物医学方面的研究非常重要,特别是疫苗开发、癌症治疗、细菌感染等领域。而目前,获得OMVs的最常用方法是超速离心,但这种方法不仅操作过程复杂、耗时,同时还需要专业的操作人员。且超速离心机昂贵,操作时具有潜在的风险,各种原因使其难以得到推广,这将限制OMVs的开发以及后续研究进展。因此,有必要开发一种快速有效分离提取OMVs的技术。在此背景下,本文利用DNA四面体良好的可控性、生物相容性和易修饰性,将其与具有疏水性的胆固醇相结合,设计并构建一种操作简单、稳定性高的具有膜锚定作用的DNA四面体（DNA tetrahedron,TDN）,用于分离提取大肠杆菌OMVs。将TDN与链霉亲和素免疫磁珠结合,利用膜锚定作用和磁吸附作用实现OMVs的富集并分离提取。通过实验研究发现,TDN可以有效的锚定在OMV表面,通过此方法获得的OMVs大小在20-200 nm之间,呈无色透明的球状小泡,边缘光滑、整齐,结果与已有文献报道一致。通过实验证明,该方法不仅可以快速有效的分离提取OMVs,并且与超速离心法得到的OMVs在形态和蛋白类型等功能方面都具有相似的结果,二者具有一致性。因此,通过功能修饰的DNA锚定OMV的富集策略,有望成为OMV分析前分离提取的新方法。
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