论文部分内容阅读
目的:本实验检测雄甾烷受体配体CITCO对卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响，并联合化疗药物顺铂、紫杉醇进行对卵巢癌化疗效果的研究，进一步探讨雄甾烷受体通路和多药耐药(Multidrug resistance，MDR)现象的关系。 方法:通过噻唑蓝染色法(MTT)、细胞活性试验、实时定量聚合酶链反应(quantitative Real-Time PCR，qRT-PCR)和凋亡试验检测对SKOV-3细胞生长、活性、凋亡及基因表达水平的影响。 细胞生长检测方法:应用MTT检测单独使用CITCO对SKOV-3细胞的生长影响。应用MTT和细胞活性试验检测单独使用化疗药以及与CITCO联合用药后对SKOV-3细胞生长的影响; qRT-PCR:在单独使用化疗药和与CITCO联合用药的情况下，应用该方法研究给药24 h和48 h SKOV-3细胞的雄甾烷受体通路相关基因NR113，MDR1和UGT1A1的表达变化; 凋亡试验:应用TUNEL assay研究单独使用化疗药和与CITCO联合用药的情况下，24 h和48 h SKOV-3凋亡细胞的表达量的变化; 统计分析:应用SPSS19.0软件，采用方法为单因素ANOVA及students T检验对结果进行分析。实验数值通过均值±标准差表示，p＜O.05为统计学有意义。 结果: 1、细胞生长检测:应用不同浓度CITCO对细胞进行处理后生长率无显著改变。给药24 h和48 h后单独应用10μmol/L顺铂组相对于与CITCO联合用药组抑制细胞生长效果更加显著(p＜0.05)。给药24 h和48 h后单独应用5μmol/L紫杉醇组相对于联合应用CITCO组抑制细胞生长效果更加显著(p＜0.05)。细胞活性试验表明联合CITCO的化疗药物组细胞活性相对单纯抗癌药组明显增加(p＜0.05)。 2、qRT-PCR发现CITCO、顺铂、紫杉醇分别作用卵巢癌细胞后NR113表达倍数相对于对照组均有增加。这两种化疗药物分别与1μmol/L CITCO联合用药后，NR113，MDR1，UGT1A1基因表达水平上升(p＜0.05)。 3、凋亡结果显示联合应用组细胞凋亡率低于单独化疗药给药组的凋亡率(p＜0.05)。 结论:雄甾烷受体配体CITCO可抑制化疗药物顺铂或紫杉醇对卵巢癌SKOV-3细胞的化疗效果。雄甾烷受体与肿瘤多药耐药现象存在相关性，雄甾烷受体激活后可促进多药耐药现象的产生。