响应面优化超声辅助蒜头果中神经酸提取工艺及其HPLC分析

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蒜头果作为我国特有的单属种植物,是中国特有的古老木本油料树种。蒜头果仅少量生长于广西西部山区和云南东部地带,种群自然分布的区域及其狭小。蒜头果种仁油中富含的神经酸会因地理位置及制备方法等不同,虽神经酸的含量都依旧很高,但各组分之间的含量还是存在着少量的差异。神经酸具有多种功能如促进神经细胞增殖和分化、使沉闷的脑细胞活动起来从而延缓大脑老化、调整血脂血糖等。研究人员经过对超长脂肪酸的基因学和代谢的探究察觉出,基因表达从而体内脂肪以及能量的代谢受到改变能够被日常膳食中获取体内的神经酸含量大小所影响。精神错乱和注意力缺陷障碍等神经系统疾病也与体内神经酸含量相关。神经酸的多种生理药理活性在医学领域上所含价值极高。例如提高婴幼儿智力水平、治疗阿兹海默病和身体免疫缺乏性疾病等。目前,报道神经酸检测方法主要以气相色谱为主,由于神经酸其沸点很高,完全气化时所需要的温度很高,所以在检测时一般都会将其甲酯或乙酯化,转化为沸点更低的酯类化合物,处理步骤复杂且在化学反应过程容易存在物质反应不完全的情况,而造成测定值存在误差较大等问题。本实验采用的原料为采自云南省文山自治州广南县油茶研究所的蒜头果的种仁,对蒜头果种仁油的超声辅助法提取工艺、蒜头果种仁油中混和脂肪酸皂化酸化工艺与蒜头果种仁油中的神经酸分离提纯工艺展开了系统的研究。高效液相色谱法具有检测力高,步骤简单易操作等优点且该方法避免了衍生化这一过程,是对神经酸直接进行测定的一种定量分析方法。本实验建立了新的高效液相色谱法测定神经酸浓度,通过响应面法优化出最佳的超声辅助提取蒜头果种仁油的新方法。实验内容与成果如下:1、将蒜头果种仁油中的神经酸提取并提纯,采用高效液相色谱法测定蒜头果种仁油中的神经酸含量,在色谱条件为:流速1.0ml/min;柱温:26℃;检测波长:205nm;进样量10μL。优化HPLC法测定神经酸含量流动相的最优比例(甲醇-乙腈-四氢呋喃-0.4%乙酸水溶液为12:80:5:5)并在此比例下检测出神经算样品与标准品出峰时间在18min左右基本一致。2、采用超声辅助提取技术,用石油醚溶液对蒜头果种仁油进行提取,将提取工艺的主要因素进行单因素实验得出料液比、提取温度、超声时间等条件对蒜头果种仁油提取的影响,进行考察再通过响应面优化实验,本实验的最佳提取工艺件为:超声时间30min,提取温度60℃,料液比1:14(g/ml)。理论上的得油率为40.534%,实际得油率为40.011%,基本吻合。
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