Burkitt林巴瘤起源于滤泡生发中心,是一种高度恶性的B细胞淋巴瘤,化学治疗依然是目前临床治疗的重要手段,然而,要达到更好的治疗效果必须要搞清楚化疗药物的作用机理。三氧化二砷(As2o3)作为临床应用的新型化疗药物,在治疗急性早幼粒细胞白血病及其它血液系统恶性肿瘤和实体瘤方面取得了良好的疗效。大量研究表明As203抑制肿瘤生长的机制十分复杂,其深层次作用的细胞分子机制尚有待进一步深入研究。细胞自噬是一种受着严密调控的溶酶体降解途径,是细胞受到压力刺激时通过降解受损细胞器或大分子物质而使细胞免遭损伤的应激保护机制。自噬在肿瘤发生、发展及治疗中发挥着重要作用,然而,有关肿瘤细胞中不同自噬途径的相互关联以及自噬与细胞死亡关系的研究目前仍存在诸多相互矛盾的观点。有研究认为,自噬是肿瘤细胞对化疗药物损伤所做出的应激保护反应,有利于肿瘤细胞的存活。但也有研究证实,过度活化的自噬可导致细胞受损,严重时引起细胞死亡,是一种不同于凋亡的所谓自噬性细胞死亡。随着近年来研究的不断深入,人们发现自噬与凋亡之间存在密切的联系,并可能受共同上游分子的调控。然而,有关药物诱发的细胞自噬和细胞凋亡的关系及转归仍然存在着诸多未解之谜。本研究以Burkitt淋巴瘤Raji细胞为研究对象,观察As203诱导的Raji细胞的自噬现象以及与As203诱导的细胞凋亡的关系和分子机制,并探讨Raji细胞在营养缺乏和As203等不同压力刺激下,巨自噬(通称为自噬)与分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy, CMA)的变化及其相互关系。我们的研究结果表明：①As203可显著抑制Raji细胞增殖,并呈时间和剂量依赖关系,24h、48h和72 h的IC5o值分别是3.51±0.13 μ mol/L,1.57μ0.32 μ mol/L 和 1.03±0.08μmol/L。AS2O3可诱导Raji细胞发生凋亡和G2/M周期阻滞。②As203还可显著提高Raji细胞的自噬活性,表现为胞浆内自噬体数量、LC3-II/LC3-I的比值以及自噬性底物P62蛋白的降解程度等均明显增加。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)可显著抑制As203诱导的细胞自噬水平,同时还可缓解As203诱导的细胞凋亡和周期阻滞,增加细胞存活率。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin, Rapa)的作用与3-MA-好相反。提示As203诱导Raji细胞发生的自噬可促进细胞死亡或凋亡。③3-MA可逆转As2O3诱导的Beclin-1、p53等基因的表达上调以及Bcl-2基因的表达下调,而Rapa的作用则相反。提示As2O3诱导的Raji细胞自噬活性与凋亡之间存在密切的联系,其可能共同受Beclin-1、p53以及Bcl-2等基因的表达调控。④巨自噬与分子伴侣介导的自噬是两种不同的自噬形式。我们的研究证实,在饥饿诱导的Raji细胞中,巨自噬与CMA相继顺序而非同步被激活,巨自噬活性在饥饿的初期(3-6 h)迅速被活化并达到峰值,随着饥饿时间的延长,伴随巨自噬水平的下降,CMA的活性逐渐增加。但在As2O3处理的Raji细胞中巨自噬水平显著增加,而CMA活性并未见明显增强。只有当巨自噬活性被3-MA抑制后,其CMA活性才显著增强。提示在肿瘤细胞中巨自噬与CMA间存在着相互协调和补充的关系,不同自噬途径之间可相互转换以应对不同压力应激所致的细胞损伤。综合上述,As2O3诱导的Raji细胞中自噬和细胞凋亡现象共存且可能受共同基因的调控,As2O3诱发的强烈而持续的巨自噬可促进细胞凋亡或死亡。不同强度的外界刺激会相继引发肿瘤细胞不同的自噬途径,以应对这些刺激引起的细胞损伤。本研究有助于更好地理解As2O3抗淋巴瘤的细胞分子机制,以及肿瘤细胞不同自噬途径相互协调应对压力胁迫的应答方式,为临床应用自噬调控剂与化疗药物联合治疗恶性淋巴瘤提供了新的思路。