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目的:①通过检测IDO和IL-10在正常妊娠妇女和子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨IDO和IL-10在子痫前期发病及其病理生理过程中的作用。②探讨胎盘组织中IDO和IL-10表达水平之间的相关联系。方法:1研究对象:(1)子痫前期组:选取2007年1月-2007年5月在河北医科大学第二医院妇产科检查并住院分娩的重度子痫前期患者20例(重度子痫前期组),其中早发型重度子痫前期患者(发病孕周≤34周)10例,孕妇平均年龄28.8±4.03岁(24-35岁),平均孕周33.54±1.24周(31+2-35+1周);晚发型重度子痫前期患者(发病孕周>34周)10例,平均孕妇年龄28.50±4.55岁(22-31岁),平均孕周37.37±1.98周(35-41+1周)。子痫前期诊断和分类标准参照《妇产科学》(第六版)。早发型重度子痫前期的诊断标准按照《Willams Obstetrics》第21版。(2)正常妊娠组:选择同期我院分娩的正常孕妇15例,平均孕妇年龄27.80±2.94岁(24-33岁),平均孕周39.89±0.66周(38+6-40+4周)。孕妇均为初孕单胎,无反复流产史,未经生殖技术帮助,排除内外科合并症。研究对象均以剖宫产结束妊娠。2标本采集胎盘娩出后5min内采集其母面正中(避开出血、梗死及钙化区)大小约1×1×1cm~3的组织块,用干纱布吸干血迹,置10%中性福尔马林溶液中固定24-48小时,常规石蜡包埋,蜡块保存备用。3实验方法:先采用HE法做切片染色,之后采用免疫组织化学法检测组织中IDO和IL-10的表达。所有切片染色均在相同条件下进行。采用Med 6.0数码医学图像分析系统分别计算阳性细胞的积分光密度值(OD)值代表各项指标的表达强度。激光扫描共聚焦显微镜技术荧光染色法(IDO、PCK双标)检测IDO表达在胎盘的定位。4统计学分析:所有数据均采用SPSS13.0进行处理,结果用均数±标准差(x_±s)表示,采用t检验、单因素方差分析,相关分析采用Pearson相关分析,以α=0.05作为显著性检验水准。结果:1 IDO和IL-10在胎盘组织的表达定位:IDO主要表达于胎盘绒毛的合体滋养细胞、尼塔布赫层侵袭的绒毛外滋养细胞(extravillous cytotrophoblast,EVT),胎盘绒毛血管内皮细胞和间质散在的淋巴细胞也有少量表达,主要定位在绒毛的合体滋养细胞的细胞质、EVT的细胞核和细胞质均有表达。IL-10主要表达于胎盘绒毛的合体滋养细胞和尼塔布赫层的EVT。2 IDO和IL-10在正常妊娠组和子痫前期组胎盘的绒毛合体滋养层表达水平比较: IDO和IL-10在正常妊娠组的平均OD值是0.1600±0.0150及0.1567±0.0187;IDO和IL-10在子痫前期组的平均OD值是0.1359±0.0189及0.1290±0.0331,与正常妊娠组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3 IDO和IL-10在正常妊娠组和胎盘的尼塔布赫层EVT表达水平比较:IDO和IL-10在正常妊娠组的平均OD值是0.1656±0.0239及0.1561±0.0221;IDO和IL-10在子痫前期组的平均OD值是0.1371±0.0262及0.1277±0.0315,与正常妊娠组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4 IDO和IL-10在子痫前期晚发组和早发组胎盘的绒毛合体滋养层表达水平比较:IDO和IL-10在晚发组的平均OD值是0.1417±0.0211及0.1278±0.0421;IDO和IL-10在早发组的平均OD值是0.1294±0.0147及0.1302±0.0232,与晚发组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。5 IDO和IL-10在子痫前期晚发组和早发组胎盘的尼塔布赫层EVT表达水平比较:IDO和IL-10在晚发组的平均OD值是0.1444±0.0279及0.1288±0.0378;IDO和IL-10在早发组的平均OD值是0.1288±0.0230及0.1278±0.0248,与晚发组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。6 Pearson相关性分析:子痫前期组和正常妊娠组胎盘绒毛、EVT表达的IDO和IL-10与胎儿出生体重呈显著正相关,与平均动脉压呈显著负相关。子痫前期患者和正常孕妇胎盘EVT的IDO表达和IL-10的相关系数为0.475(P<0.05),呈显著正相关。结论:1 IDO主要表达于胎盘绒毛的合体滋养细胞、尼塔布赫层的EVT,子痫前期患者的表达强度低于正常妊娠妇女,表明IDO的减少可能参与子痫前期的发病。2 IL-10主要表达于胎盘绒毛的合体滋养细胞、尼塔布赫层的EVT,子痫前期患者的表达强度低于正常妊娠妇女,表明IL-10的减少可能参与子痫前期的发病。3尼塔布赫层的EVT是与母体的免疫系统接触最近的胎儿细胞,EVT有IDO和IL-10的表达,对抑制T细胞免疫反应防止胎儿被排斥起到重要的保护作用。4因为子痫前期患者胎盘IDO和IL-10的表达降低,而且胎盘EVT的IDO表达和IL-10呈显著正相关,所以子痫前期患者胎盘IDO表达下调不是由于IL-10的直接抑制作用造成的。推测在同时产生IDO和IL-10的滋养细胞,IL-10可能通过不同机制对IDO进行双向调节。