【摘 要】
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目的:本论文旨在分子水平上通过高通量测序技术分析根系分泌物、ACC脱氨酶活性根际细菌与植物促生能力之间的互作关系,并为建立根系分泌物与ACC脱氨酶活性根际细菌的促生作用检测体系奠定方法论基础。方法:（1）对于ACC脱氨酶活性菌株的筛选,采用了多用培养基富集法收集菌株,后通过常用培养基如NB培养基、LB培养基、King B培养基、TSA培养基及TSB培养基进行分离纯化,最后通过特定培养基如:PAF培
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目的:本论文旨在分子水平上通过高通量测序技术分析根系分泌物、ACC脱氨酶活性根际细菌与植物促生能力之间的互作关系,并为建立根系分泌物与ACC脱氨酶活性根际细菌的促生作用检测体系奠定方法论基础。方法:（1）对于ACC脱氨酶活性菌株的筛选,采用了多用培养基富集法收集菌株,后通过常用培养基如NB培养基、LB培养基、King B培养基、TSA培养基及TSB培养基进行分离纯化,最后通过特定培养基如:PAF培养基、DF培养基以及ADF培养基进行诱导筛选。后续对筛选出的具有ACC脱氨酶活性的根际细菌进行酶活性测定、相关生理生化实验及抑菌和抗氧化活性实验。（2）对于根系分泌物的收集及鉴定,先对薰衣草幼苗进行砂培,后进行水培,收集分泌物溶液,采用0.45μm的过滤膜对分泌物溶液进行过滤,后通过减压旋转蒸发及冷冻干燥收集分泌物固体并通过相关仪器设备对其进行鉴定。（3）对于促生实验,通过液体菌种接种法,分别记录菌株及分泌物溶液对小麦种子及小麦幼苗的相关形态学数据的影响,利用SPSS25.0软件进行分析探究。结果:（1）分离得到5株具有ACC脱氨酶活性的菌株,分别为Pseudomonas rhizophila;Pseudomonas savastanoi;Klebsiella pasteurii;Klebsiella pneumoniae;Serratia plymuthica。ACC脱氨酶酶活力分别为0.546U/mg、0.487U/mg、0.277 U/mg、0.312 U/mg、0.081 U/mg,其中Pseudomonas rhizophila的ACC脱氨酶酶活力最高,而Serratia plymuthica的ACC脱氨酶酶活力最低其中前4株菌株具有显著的抑菌活性及抗氧化活性。Pseudomonas rhizophila,Pseudomonas savastanoi,Klebsiella pasteurii,Klebsiella pneumoniae也表现出显著的抑菌活性及抗氧化活性。（2）通过对薰衣草根系分泌物的收集和分析,我们发现了306种化学成分。这些成分主要分为9大类,包括酸类、醇类、糖类、氨基酸类、胺类、嘌呤嘧啶类、酯类、酮类和酚类。其中,酸类、醇类、糖类和氨基酸类的含量相对较高,分别占35.61%、29.07%、14.91%和4.51%。胺类的相对含量为1.02%,而嘌呤嘧啶类、酯类、酮类和酚类的相对含量较低,仅在0.13%到0.68%之间。这表明薰衣草根系分泌物的成分非常丰富且复杂,含量差异也较大,而酸类、醇类、糖类和氨基酸类是其中的主要成分。（3）通过对小麦种子及小麦幼苗的促生实验,可以发现5株菌株中的前4株Pseudomonas rhizophila;Pseudomonas savastanoi;Klebsiella pasteurii;Klebsiella pneumoniae分别在小麦成长的不同阶段表现了一定程度的促生作用,Serratia plymuthica对小麦的成长表现了一定程度的抑制作用。结论:经过实验,我们发现4种根际ACC脱氨酶细菌在根系分泌物的作用下可以有效地促进植物的生长。在对比实验中,添加了该细菌的处理组的植物生长情况明显优于未添加该细菌的对照组。综上所述,根际ACC脱氨酶细菌是一种有潜力的植物生长促进菌,可以作为一种新型的生物肥料应用于植物生长中,具有一定的可行性和应用前景。这些发现为生物肥料的开发提供了新思路和新方向,具有重要的科学意义和应用价值。
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