川续断的化学成分和质量标准研究

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川续断(又名鼓槌草、和尚头)始载于《神农本草经》,被列为上品,临床上主要应用于腰膝酸软,风湿痹痛,跌打损伤,崩漏,胎漏。川续断做为传统的大宗药材之一,用量大、药效好,是骨伤科和妇科常用中药。随着研究的不断深入,发现川续断还具有抗氧化、抗衰老、提高学习记忆能力等药理活性,表明川续断具有较大的应用研究价值。《中国药典》2010版规定川续断皂苷Ⅵ含量不低于2.0%,仅仅以单一化学成分来控制其药材质量,显得片面。本文对川续断的化学成分进行了分离研究,并对川续断药材的质量标准进行了系统全面的研究,以期进一步为川续断药材的化学基础研究、质量控制研究及临床应用研究提供科学依据。本课题研究内容主要分为以下几个方面:第一部分:主要从化学成分、药理作用、临床应用等方面对川续断的研究现状进行了综述,共引用文献49篇。第二部分:对川续断有效部位化学成分进行系统的提取、分离、纯化。采用70%的乙醇回流提取,然后采用D101大孔树脂富集、分段,进一步采用硅胶、C18反相硅胶,Sephadex-LH20凝胶、制备柱等方法分离纯化,并同时应用TLC法、HPLC法跟踪检测结果得到单体化合物6个。根据化合物的理化性质以及紫外、红外、质谱、核磁等波谱数据鉴定这6个化合物分别为:胡萝卜苷(Daucos terol)、马钱苷(Loganin)、当药苷(Sweroside)、川续断皂苷Ⅵ(AsperosaponinⅥ)、川续断皂苷乙(Dipsacoside B)、另一个化合物已经确定为三萜皂苷类成分,具体结构正在解谱中。第三部分:川续断药材质量标准的研究1应用香草醛-高氯酸显色法测定川续断中总皂苷的含量。首先利用正交分析法优选出总皂苷的最优显色条件,然后采用紫外-可见分光光度法,在550nnm下建立了川续断药材总皂苷含量测定方法,并对来自全国各地的52批样品进行了含量测定。2应用HPLC法,采用马钱苷、当药苷、川续断皂苷Ⅵ为化学对照品,建立了川续断药材质量的多成分、多指标含量测定方法;并对采自全国各地的52批川续断药材进行了含量测定。采用DPS软件对样品进行聚类分析,样品被分为四类。3建立一种川续断药材的HPLC-UV指纹图谱分析方法,并与不同产地川续断药材的指纹特征相比较,为评价川续断药材质量提供新的方法。采用HPLC-UV法测定了19批不同产地的续断样品。色谱条件:色谱柱:Ultimate XB-C18 (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,柱温:25℃,流速:1mL·min-1,检测波长:212nm。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》建立了川续断药材的指纹图谱21个特征峰共有模式,并对不同来源样品的相似度进行了比较。4完成了对川续断药材质量标准的起草及起草说明
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