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食用土当归Aralia cordata Thunb.为五加科楤木属植物,味辛、苦、性温,具有祛风除湿、舒筋活络及活血止痛的功效,主要用于治疗风湿疼痛、腰膝酸痛、四肢痿痹、腰肌劳损等症。食用土当归主要含有机酸、皂苷、挥发油等成分,其中的有机酸主要为二萜羧酸及脂肪酸类成分。 本论文对食用土当归总有机酸制备工艺、药效学、化学成分以及质量控制方法进行研究,主要研究内容及结果如下: 第一部分对食用土当归总有机酸制备工艺进行研究,首先建立了酸碱滴定法测定食用土当归中总有机酸的含量测定方法;并在此基础上,采用单因素试验和正交试验对食用土当归总有机酸提取工艺进行考察研究,得出食用土当归总有机酸的最佳提取工艺;然后采用有机溶剂萃取与酸碱法相结合,对食用土当归总有机酸进行纯化工艺研究,筛选出最佳的纯化方法。 第二部分对食用土当归总有机酸的抗炎镇痛、抗肿瘤药效学进行初步研究,通过采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀法、热板法、以及醋酸致小鼠扭体法4种经典抗炎镇痛实验,观察总有机酸的抗炎镇痛作用;并通过考察总有机酸对转基因斑马鱼血管生成、皮肤细胞凋亡及皮肤荧光细胞发育的影响,观察其抗肿瘤活性,结果表明食用土当归总有机酸具有较好的抗炎镇痛作用及一定的抗肿瘤的作用趋势。 第三部分对食用土当归总有机酸进行化学成分研究,采用柱色谱法分离得到7个化合物,鉴别了5个,分别是海松酸(15-dien-19-oic acid,I)、贝壳杉烯酸((ent)-kaur-16-en-19-oic acid,II)、β-谷甾醇(β-sitoster,III)、豆甾醇(Stigmasterol,IV)、16α,17-二羟基-(-)-栲利烯酸(16ɑ,17-dihydroxy-(-)-kauran-19-oic acid,VII),化合物Ⅴ为一个油状的主要脂肪酸;化合物Ⅵ正在鉴定中,其中化合物Ⅶ为首次从该植物中得到。此外,实验中还采用GC-MS对总有机酸化学成分进行补充分析,从中共鉴定出10个有机酸,其中质量分数较高的是亚油酸(21.75%)和棕榈酸(13.68%)。 第四部分对食用土当归总有机酸的质量控制方法进行研究。测定总有机酸的水分、总灰分、酸不溶性灰分,并制定相应限度;以海松酸为对照,建立了薄层色谱鉴别方法;运用酸碱滴定法测定10批总有机酸提取物中总有机酸的含量;建立食用土当归总有机酸中贝壳杉烯酸及海松酸的HPLC含量测定方法。