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目的:观察七氟醚预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带内T细胞死亡耦联基因8(T celldeath-associate dgene 8,TDAG8)表达的影响。
方法:①第一部分实验:将SD成年雄性大鼠(体重250-280g),随机分成五组(n=12):正常组(N组)、脑缺血再灌注6h组(A组)、脑缺血再灌注12h组(B组)、脑缺血再灌注24h组(C组)和脑缺血再灌注48h组(D组)。大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的建立采用大脑中动脉内线栓阻断(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法,缺血2h后再灌注。对大鼠进行神经行为学评分后,取大脑行2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenylte-trazolium,TTC)染色以计算脑梗死容积,采用real-time PCR法检测大鼠脑缺血半暗带内TDAG8mRNA的表达情况。②第二部分实验:体重250-280g的SD成年雄性大鼠随机分为三组(n=18):正常组(N组)、脑缺血再灌注48h组(IR组)和七氟醚预处理组(Sevo组)。采用MCAO制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。缺血2小时再灌注48h。Sevo组在造模前吸入2%的七氟醚30rain,N组和IR组吸入氧气。对大鼠进行神经行为学评分后,取大脑行TTC染色以计算脑梗死容积,利用real-time PCR法和蛋白印迹法检测大鼠脑缺血半暗带内TDAG8mRNA和蛋白的表达情况。
结果:第一部分实验:①脑梗死容积:N组未见梗死灶,A、B、C和D均出现梗死灶,且随着再灌注时间的延长脑梗死容积逐渐增大;组内各相邻再灌注时间点比较,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。②TDAG8mRNA的表达:A、B、C和D组大鼠脑缺血半暗带内TDAG8mRNA的表达与N组相比,均显著增加(P<0.05);且随着再灌注时间的增加TDAG8mRNA的表达逐渐升高,但A、B和C组之间TDAG8mRNA的相对表达量无统计学意义;D组TDAG8mRNA的相对表达量均高于A、B和C组(P<0.05)。第二部分实验:①与N组相比,IR组和Sevo组脑梗死容积均显著升高(P<0.05);与IR组相比,Sevo组脑梗死容积显著降低(P<0.05)。②与N组相比,IR组缺血半暗带内TDAG8mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05),Sevo组缺血半暗带内TDAG8mRNA和蛋白的表达高于N组,但差异无统计学意义;与IR组相比,Sevo组TDAG8mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05)。
结论:随着再灌注时间的增加,脑梗死容积和缺血半暗带内TDAG8mRNA的表达也随之增加;七氟醚预处理使大鼠脑梗死容积、脑缺血半暗带内TDAG8mRNA和蛋白的表达明显减少。