本实验应用淋巴细胞分离技术，分离了藏猪外周血液淋巴细胞。将藏猪外周血液淋巴细胞进行体外培养，在ConA的刺激下培养70h后，提取培养的淋巴细胞总RNA，应用RT-PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的cDNA，克隆到pE)18-T载体，进行了序列分析。序列分析表明藏猪白细胞介素-4基因(TPIL-4)的cDNA长度为440bp，开放阅读框为402bp，由134个氨基酸残基构成，分子量15 KDa，等电点8.24。将得到的序列在GenBank和EMBL数据库中进行了同源比较，结果表明它与来源于长白猪的IL-4有2个碱基差异，99％同源性；与来源于杂交猪T细胞的IL-4比较，同源性为98％，说明猪种及组织细胞来源的不同可能使基因有一定的差异。证明本实验克隆到了藏猪白细胞介素-4的全基因，为进一步研制有效的免疫基因制剂奠定了良好的基础。 将克隆到的藏猪IL-4 cDNA片断用DNA重组技术插入pCEX4T-1质粒，构建了藏猪IL-4基因的原核表达质粒pCTPIL-4，转化大肠杆菌BL21，以BamHⅠ酶切筛选、EcoRⅠ和PmaCⅠ酶切鉴定转化子，获得了含440bp插入克隆基因正确的重组子。以IPTG诱导融合蛋白表达，经RT-PER检测发现440bp的特异性IL-4条带；通过SDS-PAGE分析，在41 KDa处出现GST—TPIL4融合蛋白条带，证明藏猪IL-4基因得到了正确转录和表达。从制备性聚丙烯酰胺凝胶中回收融合蛋白，用MTT法测定重组蛋白刺激猪血液淋巴母细胞增殖反应活性，结果表明融合蛋白具有免疫刺激活性，提示其可直接用于免疫学研究应用。以重组蛋白免疫家兔，制备了滴度为1：12，800的抗藏猪IL-4高免兔血清，为用免疫PCR等方法检测藏猪IL-4、研究猪IL-4的生物学效应奠定了基础。