禽流感(avian influenza，AI)是由A型禽流感病毒(avian influenza A virus，AIV)引起的禽类烈性传染病，世界各地都有爆发和流行，给养禽业造成了巨大的经济损失。1997年以来，亚洲多数国家和地区相继爆发了H5N1亚型禽流感，并引起人的感染及死亡，禽流感病毒的基础研究日益成为公共卫生学领域的研究热点。 PB1B是禽流感病毒聚合酶蛋白PB1与PB2亚基的结合位点，由于聚合酶蛋白的结构研究尚处于初期阶段，其催化功能的具体机制有待进一步研究，采用晶体学方法探明禽流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA亚基的结构、相互作用位点和作用方式以及各亚基在病毒复制、转录、翻译和识别宿主中的作用，找出其关键结构域和酶活性位点及其他功能位点，有望开发出高效、低毒、副作用小的破坏酶结构或抑制酶活性的新型的抗禽流感病毒新药，用于有效地防治禽流感。 本实验应用PB1B基因进行体外扩增，并在Escherichia coli中得以高效的表达，通过Ni-NTA亲和层析、Resource Q离子交换层析和Superdex-75凝胶层析分离等技术进行目标蛋白的分离纯化；采用悬滴气相扩散法对蛋白进行结晶；通过结晶条件的优化和筛选，获得适合X-射线衍射的不同空间群的晶体及高质量的X衍射数据。 实验结果表明，构建的重组质粒pET-28a-PB1B，经表达及优化，获得了分子量为47.6kDa的高纯度可溶性目标蛋白。经悬滴气相扩散，获得了两种不同结晶条件的适合X-射线衍射的两种不同空间群的晶体。第一种晶体的衍射数据分辨率为2.5A，空间群为P222，晶胞参数为a=65.7(A)，b=74.3(A)，c-163.1(A)，α=β=γ=90°，属于正交晶型；第二种晶体的衍射数据分辨率为2.8(A)，空间群为C2221，晶胞参数为a=159.1(A)，b=171.5(A)，c=113.6(A)，α=β=γ=90°，属于正交晶型。