IgY海藻酸钠—壳聚糖微囊的制备及其性能研究

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口服特异性卵黄免疫球蛋白(Egg Yolk Immunoglobulins,IgY)可治疗由细菌或病毒引起的肠道疾病,具有安全无残留、不产生抗药性、成本低和服用简便等优点,是一种具有广阔应用前景的抗生素替代品。但IgY容易在高强度的胃酸环境中被胃蛋白酶降解,失去抗体活性。因此,如何避免IgY在胃中失活,在小肠中稳定地发挥作用,是一个亟待解决的问题。 本研究采用高压静电成囊技术,选取天然材料海藻酸钠(Alginate,ALG)和壳聚糖(Chitosan,CTS)作为囊材,制备口服型IgY-ALG-CTS微囊,使IgY在胃中受到保护而免受降解,并在肠道中定点释放。本研究具体考察了各种物理参数对空白微囊形貌及粒径的影响;并在此基础上研究了投药量、ALG浓度、CTS浓度、CaCl2浓度及CTS溶液的pH对微囊的包封率、IgY的活性、以及微囊在模拟胃肠液中释放行为等性能指标的影响。 对空白微囊的研究结果表明,外加电场强度是影响微囊粒径的主要因素,泵的推进速度和ALG、CTS、CaCl2溶液的浓度主要影响微囊的机械强度,对微囊粒径的影响不大。优化条件为:外加电压6kv,针头液面距40mm,推进速度60ml/h,ALG浓度1.8%,CaCl2浓度0.5%,CTS浓度0.4%。优化条件下制得的微囊球形圆整,冷冻干燥后平均粒径为152.28μm,且粒径分布集中。 对IgY微囊的研究结果表明,微囊制备的优化条件为:投药量10mg/ml,CaCl2浓度0.1%,CTS浓度0.4%,ALG浓度2%,CTS溶液的pH为4。在此优化条件下制备的IgY微囊包封率高于90%,IgY在模拟胃液中累积释放率小于10%,而在模拟肠液中累积释放率大于90%。另外,ELISA和SDS-PAGE结果显示,IgY微囊在通过模拟胃液后进入模拟肠液,释放出完整的IgY,而且抗体的活性保持在80%以上。达到了在胃中保护IgY免受胃蛋白酶降解,使之以较高活性在小肠释放的目的。 以ALG和CTS为囊材制备的IgY微囊,作为一种新型的口服动物保健产品,将具有良好的产业化前景。本研究也为其他口服生物活性物质的控释制剂开发奠定了基础。
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