本论文对这两个关键酶在烷烃发酵过程中的变化特征进行了研究，同时对二者的基因进行了克隆和表达研究。 本论文同时对C.tropicalis转化系统的建立进行了尝试。在通过诱变筛选方法难以获得稳定生长的Ura-营养缺陷型菌株之后，主要尝试了利用外源选择标记及体内同源重组的方法，定向破坏C.tropicalis的URA3基因。首先对C.tropicalis进行了不同生长抑制物质的抗性试验，确定了有效的潮霉素B及甲醛抑菌浓度条件。同时在分离了URA3-a、URA3-b、POX4和GPD1等基因的基础上，分别构建了携带不同甲醛或潮霉素B抗性基因表达盒的URA3-a整合载体。在此条件下，对URA3-a基因进行了破坏试验，发现只有突变后的SFA1基因能够被正确表达，并获得阳性克隆。在确定URA3-a基因被敲除后，利用构建的URA3-b缺失突变盒，以及反向筛选方法，对URA3-b基因也进行了破坏。通过两步基因破坏，获得了具有5-FOA抗性的Ura-营养缺陷型菌株wl-ab和w6-ab，为进一步的研究打下了基础。