【摘 要】
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目的:1.探讨CD24对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。2.探讨CD24是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为。方法:1.通过质粒转染构建CD24表达上调的MDA-MB-231细胞株;实验分为三组,CD24转染组和转染空白质粒的阴性对照组（NC组）以及未做转染的空白组（Control组）。2.采用Western b
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目的:1.探讨CD24对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。2.探讨CD24是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为。方法:1.通过质粒转染构建CD24表达上调的MDA-MB-231细胞株;实验分为三组,CD24转染组和转染空白质粒的阴性对照组（NC组）以及未做转染的空白组（Control组）。2.采用Western blot法检测经过不同处理的三组MDA-MB-231细胞株中CD24蛋白表达水平。3.分别采用CCK8法、划痕试验、Transwell实验及流式细胞术检测不同CD24表达对三阴型乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。4.采用Western blot法对Wnt/β-Catenin信号通路的重要蛋白β-catenin、c-Myc水平进行检测。结果:1.Western blot法测得CD24转染组的CD24蛋白表达量（0.443±0.379）高于空白组（Control组:0.050±0.020）及转染空白质粒的阴性对照组（NC组:0.087±0.015）,差异有显著性（P＜0.05）,而Control组和NC组相比,CD24蛋白的表达无明显差异（P＞0.05）;2.CCK8法测得在0h时,三组细胞的增殖能力在经过单因素方差分析后时发现差异无显著性（P＞0.05）,从24h开始,CD24转染组（1.325±0.091）的增殖能力明显高于Control组（1.133±0.041）及NC组（1.125±0.057）,且差异有显著性（P＜0.05）,随着时间增加（从48h到72h）,差异越来越大;3.通过划痕试验测得在0h时三组细胞划痕宽度值,经过单因素方差分析后发现无统计学意义（P＞0.05）,而从24h时CD24转染组的划痕宽度（623.13±23.869）明显低于Control组（750.46±36.553）和NC组（770.15±29.225）,48h时CD24转染组的划痕宽度（434.12±32.126）也明显低于Control组（569.44±9.5070）和NC组（597.11±9.9703）,且差异具有显著性（P＜0.05）,表明CD24转染组的MDA-MB-231细胞迁移能力均高于Control组及NC组,但Control组和NC组比较并无明显差异;4.Transwell法测得CD24转染组（1.223±0.056）的细胞侵袭数均高于Control组（0.628±0.018）及NC组（0.620±0.035）,且差异具有显著性（P＜0.05）;5.流式细胞术测得CD24转染组（1.583±0.131%）的MDA-MB-231细胞凋亡率低于Control组（3.293±0.493%）和NC组（3.587±0.353%）,差异有显著性（P＜0.05）,但Control组与NC组相比无明显差异（P＞0.05）;6.采用Western blot法测得CD24转染组β-catenin蛋白表达强度为0.340±0.020,高于Control组（0.093±0.029）及NC组（0.083±0.015）,差异具有显著性（P＜0.001）,而NC组与Control组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。采用Western blot法,测得CD24转染组c-Myc蛋白表达强度为0.447±0.015,高于未转染CD24的Control组（0.117±0.015）及NC组（0.153±0.025）,差异有显著性（P＜0.001）。结论:1.CD24促进了乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭的能力,抑制了其凋亡能力;2.CD24促进乳腺癌MDA-MB-231细胞恶性生物学行为有可能是通过Wnt/β-catenin信号通路中的β-catenin、c-Myc蛋白来发挥作用的。
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