0.05%环孢素A滴眼液对损伤角膜上皮水通道蛋白3表达的影响

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tq19822002
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目的:角膜上皮创伤是临床上极为常见的眼外伤。完善的角膜创伤修复对于维持正常的视功能和屈光手术的矫正效果具有重要影响。角膜的创伤修复过程是极其复杂的,是由多种细胞和众多细胞因子在时间和空间高度协调而完成的。水通道蛋白(aquaporin,AQPs)即是其中一种非常重要的蛋白。环孢素A(CsA)可以减轻眼表炎症,减少炎症反应对水通道蛋白的破坏。本研究采用机械法去除小鼠角膜上皮,观察角膜上皮愈合过程中AQP3的表达,同时观察0.05%CsA滴眼液治疗后对上述指标的影响,旨在探讨0.05%CsA滴眼液上调AQP3表达的作用机制,并为研究角膜创伤修复的有效治疗药物提供理论依据。方法:(1)采用2mm直径的环钻在角膜中央标记创伤区,显微镜下用机械法刮除小鼠角膜上皮的方法建立角膜上皮损伤模型。35只小鼠随机分为7组,分别于角膜上皮损伤后接受PBS及0.0125%、0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%CsA滴眼液点眼,12h后处死小鼠取角膜,进行AQP3免疫组化染色。(2)60只小鼠角膜上皮损伤后随机分为两组,30只滴PBS为对照组,30只滴0.05%CsA滴眼液为实验组。分别于损伤后0h、6h、12h、18h、24h、30h, 2%荧光素钠染色后照相,观察角膜上皮修复情况。处死小鼠取角膜,进行AQP3免疫组化染色,光镜下观察AQP3表达情况,并应用图像分析软件进行量化。结果:角膜上皮基底细胞层可见AQP3的表达,呈棕黄色颗粒状,上皮表层及基质无表达。小鼠角膜上皮损伤后,应用0.0125%、0.025%、0.05%、0.1%CsA滴眼液点眼12h,角膜上皮免疫组化AQP3的表达与PBS组比较呈递增的趋势,而应用0.2%、0.4%CsA滴眼液时,AQP3的表达则较0.1%CsA滴眼液无明显差异。选用0.05%CsA滴眼液点眼,对照组小鼠及实验组小鼠角膜上皮均在创伤后24~30h内完成修复过程,损伤后6h实验组与对照组愈合面积比较无统计学差异(P>0.05),而损伤后12h、18h、24h实验组与对照组愈合面积比较均有显著统计学差异(P<0.05)。结论:AQP3存在于小鼠角膜上皮基底细胞层。应用0.1%以下的低浓度CsA滴眼液点眼后,角膜上皮AQP3的表达增加,且呈较好的量效关系。应用0.05%CsA滴眼液点眼,可通过增加AQP3表达而加快小鼠角膜上皮损伤的修复。
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