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目的痤疮丙酸杆菌作为最早定植于哺乳动物肠道中的微生物,它与肠道细胞的互作关系以及对肠道细胞的影响一直未被研究。本研究通过痤疮丙酸杆菌活菌和灭活菌与IPEC-J2细胞共培养,观察二者对IPEC-J2细胞的生物学影响,以探讨痤疮丙酸杆菌在肠道所起的作用。方法通过LDH法检测痤疮丙酸杆菌活菌和灭活菌对IPEC-J2细胞膜的损伤率;在正置显微镜下观察经HE染色后的细胞形态变化;荧光定量PCR检测紧密连接蛋白ZO-1和occludin m RNA的表达变化。采用MTS法和台盼蓝拒染法检测与痤疮丙酸杆菌活菌和灭活菌共培养的IPEC-J2细胞活性与存活率;通过倒置显微镜观察细胞形态变化;通过荧光定量PCR法检测3种TLR受体、5种促炎细胞因子和2种抗炎细胞因子基因表达的变化。结果痤疮丙酸杆菌活菌对于IPEC-J2细胞膜具有一定的损伤性,并呈浓度依赖性;HE染色显示高浓度的痤疮丙酸杆菌活菌可致IPEC-J2细胞膜间隙变大;荧光定量PCR结果阐明痤疮丙酸杆菌活菌可明显下调ZO-1 m RNA的表达;对occludin m RNA的表达不产生影响。高浓度(1×108 CFU/m L)的痤疮丙酸杆菌活菌能明显降低IPEC-J2细胞的活性率和存活率,在倒置显微镜下可以观察到细胞出现核皱缩,凸显等现象。促炎因子与抗炎因子的荧光定量PCR结果显示,痤疮丙酸杆菌活菌能够显著上调促炎因子的表达,而对抗炎因子的表达没有作用。在IPEC-J2细胞中未检查到IL-10 m RNA的表达。TLR受体的荧光定量PCR检测结果表明痤疮丙酸杆菌活菌可以显著上调TLR9 m RNA的表达,对TLR2和TLR4的基因表达无明显影响。灭活的痤疮丙酸杆菌在以上实验结果中表现出的差异均无统计学上的意义。结论综上所述,较高浓度的痤疮丙酸杆菌活菌可能通过下调IPEC-J2细胞内连接蛋白ZO-1 m RNA的表达而影响细胞中紧密连接功能;通过上调促炎因子的表达,而改变了促炎因子与抗炎因子在IPEC-J2细胞中的动态平衡。由于细胞膜间隙的增大和炎症因子的表达失衡可能是诱发炎症反应,导致细胞死亡的原因。这一系列的生物反应可能是通过激活TLR9受体的表达而介导的,但具体机制仍不明确,还需进一步研究证实。