【摘 要】
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目的:研究在烟曲霉菌性角膜炎中,Dectin-1通过MAPK信号通路调控巨噬细胞表型相关因子的表达变化。方法:1、用烟曲霉菌刺激SPF级C57BL/6小鼠后,建立真菌性角膜炎1天、3天、5天模型,采用PCR检测M1型(TNF-ɑ、INOS、IL-6、IL-12)细胞因子和M2型(Arg-1、IL-10)细胞因子的表达变化。2、小鼠结膜下注射Dectin-1激动剂Curdlan和抑制剂laminar
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目的:研究在烟曲霉菌性角膜炎中,Dectin-1通过MAPK信号通路调控巨噬细胞表型相关因子的表达变化。方法:1、用烟曲霉菌刺激SPF级C57BL/6小鼠后,建立真菌性角膜炎1天、3天、5天模型,采用PCR检测M1型(TNF-ɑ、INOS、IL-6、IL-12)细胞因子和M2型(Arg-1、IL-10)细胞因子的表达变化。2、小鼠结膜下注射Dectin-1激动剂Curdlan和抑制剂laminaran,预处理1天,然后建立SPF级C57BL/6小鼠烟曲霉菌性角膜炎的动物模型,通过裂隙灯观察小鼠角膜炎炎症反应情况,并且记录其临床评分结果,采用免疫荧光法观察各组小鼠角膜中巨噬细胞数量变化;PCR检测巨噬细胞M1型细胞因子和M2型细胞因子mRNA水平表达变化。3、MAPK通路抑制剂(P38、JNK、ERK抑制剂)预处理RAW264.7细胞2h后,用烟曲霉菌刺激12h,PCR检测巨噬细胞M1型细胞因子和M2型细胞因子mRNA水平表达变化。结果:1、烟曲霉菌感染小鼠角膜1d、3d、5d后与对照组相比,M1型细胞因子和M2型细胞因子的mRNA水平表达明显升高(p<0.01);2、Dectin-1激动剂Curdlan预处理组与PBS对照组相比,真菌感染后3天的角膜溃疡面积明显增大,炎症评分增高(p<0.01),角膜组织中M1型细胞因子mRNA水平表达升高(p<0.01),M2型细胞因子mRNA水平表达降低(p<0.01);而Dectin-1抑制剂laminaran预处理组与PBS组相比,角膜溃疡面积明显减少,炎症评分降低(p<0.01),M1型细胞因子mRNA水平表达降低(p<0.01),M2型细胞因子mRNA水平表达明显升高(p<0.01)。3、MAPK通路抑制剂预处理组RAW264.7细胞与对照组相比,M1型细胞因子mRNA水平表达降低(p<0.01),M2型细胞因子mRNA水平表达升高(p<0.01)。结论:在小鼠真菌性角膜炎中,Dectin-1可影响小鼠角膜巨噬细胞募集,通过MAPK信号通路调控巨噬细胞表型相关因子进而调节炎症反应。
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