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柚皮素（Naringenin, NGR）是一种二氢黄酮类化合物，在中药中广泛存在。现代药理学研究表明NGR具有较强的药理活性，如抗氧化、降血脂、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化。本研究基于细胞色素P4503A（cytochrome P4503A, CYP3A）和P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）调节交叠性，研究NGR对代谢酶CYP3A和血脑屏障的多药耐药蛋白P-gp的影响。主要内容如下：1.改进生物样品分析方法改进微透析液及血浆中咪达唑仑（midazolam, MDZ）/1′-羟基咪达唑仑（1′-hydroxymidazolam,1′-OH MDZ）的LC-MSn方法，大鼠脑微血管内皮细胞（rat brain microvascular endothelial cells, rBMECs）中地高辛（digoxin, DIG）的LC-MSn方法，罗丹明123（Rhodamine123,Rho123）的高效液相色谱荧光法。实验结果显示微透析液中MDZ、1′-OH MDZ峰形较好，在5min内即可完成一次分析，MDZ和1′-OH MDZ的线性范围分别为0.78～100和0.195～12.5μg·L-1，最低定量下限0.2μg·L-1，批内、批间RSD均＜7%，RE值在-1.34%～-8%范围内。大鼠血浆样品中MDZ和1′-OHMDZ的线性范围分别为15.63～8000、3.91～1000μg·L-1.DIG与内标分离较好，在5min内即可完成一次分析，样品处理简单，线性范围为5～160μg·L-1，最低定量下限5μg·L-1.分析物Rho123的色谱峰峰型好，细胞中的杂质不干扰目标峰，其保留时间4.7min，线性范围为1～16μg·L-1.2. NGR对代谢酶CYP3A的影响研究确立脑微透析联合颈静脉取血方法，比较静脉注射NGR前后大鼠脑内及血浆中MDZ/1′-OH MDZ的药代动力学过程。微透析探针植入大鼠侧脑室，分别静脉注射5%β-环糊精（对照组）和3.75，7.5，15mg·kg-1NGR（给药组），5min后静脉注射MDZ（剂量为5mg·kg-1），同时连续收集脑透析液样品及血浆样品（按3，7，15，30，60，90，120，150min采血点进行采样），采用LC-MSn测定MDZ/1′-OH MDZ浓度，脑内药物浓度经探针回收率校正后，用WinNonlin软件计算MDZ/1′-OH MDZ的药动学参数。结果显示给予NGR后，脑中MDZ、1′-OH MDZ药代参数改变。3.75mg·kg-1NGR组中MDZ的Ke减小，t1/2升高，MRT0-∞增加；而15mg·kg-1NGR组中Ke降低，t1/2、MRT0-∞增加，1′-OH MDZ的MRT0-∞增加。股静脉给予NGR，血浆中MDZ、1′-OH MDZ的药代参数改变。3.75mg·kg-1NGR组中MDZ的Ke升高，MRT0-t、t1/2减小，AUC0-t、AUC0-∞显著性降低， CL、Vd显著性增加。7.5mg·kg-1NGR组中1′-OH MDZ的AUC0-t增加，MRT0-t显著性降低。而15mg·kg-1NGR组中MDZ的t1/2升高，AUC0-t、AUC0-∞显著性增加，MRT0-t、MRT0-∞降低。3. NGR对转运蛋白P-gp的影响研究确立rBMECs的药物摄取模型，在此模型基础上研究DIG和Rho123的摄取特性及NGR（50μmol·L-1）对二者摄取的影响。实验结果表明DIG在rBMECs摄取具有时间依赖性，10～90min细胞内DIG含量随时间延长而增加，90～120min之间达摄取稳态。与对照组相比，在40min时NGR使摄取量增加了76.2%，90min时增加了75.9%. Rho123在rBMECs摄取同样具有时间依赖性，10～60min细胞内Rho123含量随时间延长而增加，60～120min之间达摄取稳态。与对照组相比，在60min时NGR使摄取量增加了28.5%，90min时增加了48.8%.本文改进了生物样品分析方法，方法快速、灵敏，准确，满足生物样品分析要求。NGR对肝脏和脑部代谢酶CYP3A都有影响，不同剂量NGR对MDZ的脑代谢均存在抑制作用，对肝脏代谢酶CYP3A的调节与给药剂量相关。NGR可以抑制血脑屏障上P-gp的活性。脑部CYP3A和P-gp存在调节交叠性，NGR可以抑制脑部CYP3A和P-gp活性。