目的：糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病重要的慢性微血管并发症之一。长期高血糖及其引起的代谢紊乱，通过激活多种途径导致肾脏结构的不可逆改变，是终末期肾病的主要原因。DN的主要病理特征为肾小球硬化、基底膜增厚、细胞外基质(ECM)沉积等。目前DN的发病机制尚未完全明确，大量研究表明转化生长因子(transforminggrowth factor，TGF)β<,1>在其中发挥了重要作用。TGFβ<,1>过度表达可能通过促进肾小球细胞增殖、肥大，导致ECM堆积，损伤滤过屏障，介导间质纤维化及加速细胞凋亡等机制促进DN的发生发展。对TGFβ<,1>的有效抑制可能成为DN治疗的一个新靶点。有研究显示肾脏存在的色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor，PEDF)可能通过内源性抑制TGFβ<,1>等途径起到肾脏保护作用。PEDF存在于人体多种组织器官，是具有高效的抑制新生血管形成和营养神经等多种功能的糖蛋白。研究发现，PEDF在代谢性疾病特别是糖尿病视网膜病变(DR)中，有明显的保护作用。PEDF水平下降可能是DR发生的原因之一。细胞培养和动物试验结果均提示，PEDF能够抑制TGFβ<,1>过度表达，在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠体内注射腺病毒表达的。PEDF，可以明显减轻糖尿病早期微量白蛋白尿，提示PEDF对糖尿病肾脏有保护甚至治疗作用。 因此，本研究通过腹腔注射大剂量STZ，建立1型糖尿病大鼠模型，并观察该模型的肾脏病理改变和肾功能变化。检测。肾脏病变前后，肾皮质PEDF和TGFβ<,1>的蛋白表达水平及血清PEDF浓度的差别，探讨PEDF和TGFβ<,1>与DN发病机制的可能关系。 方法：雄性SD大鼠25只，随机分为正常对照组(NC组，10只)和糖尿病组(DM组，15只)。DM组隔夜空腹腹腔注射链脲佐菌素(STZ，55mg/kg)造模，NC组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。72小时测定血糖(BG)，高于16.7mmol/L认为已建立1型糖尿病模型。实验全程共持续12周，于实验的第4、8、12周末分别测定BG。第12周末实验结束前，测定体重，代谢笼收集24小时尿液，放射免疫分析法测定24小时尿白蛋白排泄量(UAE)；股动脉放血处死动物，收集血液分离血清，全自动生化分析仪测定尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、极低密度脂蛋白．胆固醇(VLDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)，酶联免疫分析法(ELISA)测定血清色素上皮衍生因子(PEDF)水平。留取肾脏称重，固定组织进行HE染色，观测肾脏形态及病理变化，用免疫组织化学和免疫荧光方法检测PEDF和TGFβ<,1>的蛋白表达水平及部位，冻存组织用Western-blot分析测定肾脏皮质PEDF及TGFβ<,1>的蛋白表达水平。 结果 1 造模72小时后，DM组较NC组大鼠BG明显升高，差异有显著性(P<0.01)，且DM组BG均超过16.7mmol/L，表明已成功建立1型糖尿病大鼠模型。第4、8、12周末，DM组BG均高于NC组，差异具有显著性(P<0.01，P<0.01，P<0.01)。 2 12周末实验结束时，DM组大鼠体重较NC组下降，差异具有显著性(P<0.01)；DM组肾重/体重较NC组升高，差异具有显著性(P<0.01)。 3 12周末实验结束时，DM组UAE较NC组升高，差异具有显著性(P<0.01)。 4 与NC组相比DM组血清BUN、Scr、TG、TC、LDL-C、ALT及AST均升高，且有显著性差异(P<0.01，P<0.01，P<0.05，P<0.05，P<0.05，P<0.01，P<0.01)，但两组VLDL-C水平差异不具显著性。 5 HE染色结果显示，与正常组比较，DM组肾小球肥大，基底膜增厚，系膜区基质明显增生，部分肾小管呈空泡变性。 6 免疫组织化学分析结果显示，与NC组相比DM组PEDF表达明显下降，阳性染色的面密度与阳性单位的乘积明显降低且有显著性差异(P<0.01)，而TGFβ<,1>表达上升(P<0.01)。免疫荧光结果显示DM组PEDF表达较NC组弱，而TGFβ<,1>表达较NC组强。 7 Western-blot分析结果显示，与NC组相比，DM组PEDF蛋白表达水平降低，而TGFβ<,1>蛋白表达水平升高，差异有显著性(P<0.01，P<0.01)。 8 血清PEDF水平测定结果显示，DM组PEDF水平较NC组略高，但差异不具有显著性(P=0.152)。 结论 1 大鼠经腹腔一次性注射大剂量STZ，可建立1型糖尿病大鼠模型。该模型具有明显的糖尿病表现，与人类1型糖尿病的临床特征类似。故此模型可用于1型糖尿病慢性并发症的研究。 2 随着高血糖持续存在，糖尿病大鼠肾脏出现不可逆损害，生理结构破坏，肾功能下降。其形态学和实验室检查均符合DN改变。因此，该模型可以用于DN的相关研究。 3 糖代谢的异常能够影响脂代谢及肝功能，共同对机体产生不利影响。 4 作为DN发生发展过程中的重要中介，TGFβ<,1>在DM组大鼠肾脏的蛋白表达水平明显增加，与肾脏病变一致。提示其在DN发生过程中具有重要作用。 5 PEDF在NC组肾脏有较高水平表达，而在长期高血糖出现。肾损害后其蛋白表达水平明显下降，且其与TGFβ<,1>的蛋白表达水平呈反相变化，提示二者之间可能存在一定的相互作用，并且二者之间水平失衡可能影响或预示DN的病程进展。 6 与肾组织PEDF水平变化相比，血清PEDF含量在肾脏病变前后无明显变化，提示循环中PEDF水平可能通过其他途径代偿维持。