【摘 要】
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哈密瓜作为新疆特色水果之一,其独特风味,味甘如蜜,肉厚细质等优良特性,赢得国内外消费者亲睐和“瓜中之王”的美誉,已成为新疆特色林果业的支柱之一。由于哈密瓜在采收时温度偏高及呼吸跃变型果实特性,采后常温贮藏极易衰老软化,严重降低果实商品价值,低温贮藏可以明显减缓果实衰老进程,由于哈密瓜属冷敏,易发生冷害,限制了冷藏和冷链流通技术在哈密瓜果实中的实际应用。虽然已有不同处理方式对哈密瓜冷害进行探讨,然而
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哈密瓜作为新疆特色水果之一,其独特风味,味甘如蜜,肉厚细质等优良特性,赢得国内外消费者亲睐和“瓜中之王”的美誉,已成为新疆特色林果业的支柱之一。由于哈密瓜在采收时温度偏高及呼吸跃变型果实特性,采后常温贮藏极易衰老软化,严重降低果实商品价值,低温贮藏可以明显减缓果实衰老进程,由于哈密瓜属冷敏,易发生冷害,限制了冷藏和冷链流通技术在哈密瓜果实中的实际应用。虽然已有不同处理方式对哈密瓜冷害进行探讨,然而,正丁醇作为磷脂酶D的特异性抑制剂,在哈密瓜果实采后对低温的拮抗能力尚未深入探讨,因此,本试验使用正丁醇处理采后哈密瓜,部分利用了RNA-Seq技术探究正丁醇对哈密瓜果实采后低温状态下的贮藏性,抗氧化能力、膜脂代谢、脯氨酸代谢的影响及对哈密瓜果实进行PLD-β基因克隆,揭示正丁醇增强哈密瓜采后耐冷性,缓解果实采后冷害状况。主要研究结果如下:（1）以‘西州密25号’哈密瓜为试验材料,筛选适宜正丁醇溶液处理浓度。试验结果表明,与对照相比,不同浓度（0.0%、0.5%、1.0%、1.5%）的正丁醇处理作用效果不同,其中浓度为1.0%正丁醇处理较其他处理可显著降低哈密瓜果实冷害指数、症状及在一定程度上抑制果皮可滴定酸含量,果肉硬度、抗坏血酸和果皮可溶性蛋白含量下降,提高冷藏期间果皮可溶性糖含量。因此,1%正丁醇溶液是缓解哈密瓜冷害的较优处理浓度。（2）哈密瓜采后经1.0%正丁醇溶液处理后对果皮进行抗氧化系统研究,结果表明,正丁醇处理能够降低过氧化氢（H2O2）含量（除0-14 d）、抑制超氧阴离子（O2-·）生成;对提高抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）（除0-7 d）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）及谷胱甘肽还原酶（GR）活力作用明显;正丁醇处理组哈密瓜果实还原型抗坏血酸（ASA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型抗坏血酸（DHA）含量均高于对照组。正丁醇通过提高果实抗氧化酶活性以及抗坏血酸-谷胱甘肽循环（ASA-DHA）底物含量,从而清除过量活性氧自由基,缓解哈密瓜冷害的状况。（3）1.0%正丁醇处理提升了哈密瓜果实磷脂酰基醇（PI）含量及不饱和脂肪酸亚油酸、亚麻酸、油酸（除14 d）、芥酸（28-42 d）含量,降低硬脂酸（0-28 d）和磷脂酸（PA）（除21 d）含量以及膜脂代谢关键酶磷脂酶D（PLD）及脂氧合酶（LOX）活性,下调Cm PLD-β和Cm LOX（42 d）表达,从而降低了果皮细胞膜透性、丙二醛含量,进一步减轻冷害。对哈密瓜膜脂关键基因PLD-β进行基因克隆发现（登录号:ON165934）,哈密瓜PLD-β与黄瓜（Cs XP5）的亲缘性最近,同源性达到100%,南瓜次之,同源性达87%,表明哈密瓜PLD-β基因在功能上与黄瓜类似,通过将PLD-β与Cs XP5碱基序列进行两重比对分析,试验扩增得到PLD-β前一段启动子区,发现两者启动子区碱基序列不一致,说明调控哈密瓜和黄瓜抗冷的转录因子可能是不同的。（4）1.0%正丁醇处理可提高哈密瓜果实鸟氨酸转移酶（OAT）、?~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）活性及Cm P5CS表达,对降低限速酶脯氨酸脱氢酶活性（Pr ODH）及其后期Cm Pro DH表达作用显著,进一步维持高脯氨酸含量,降低哈密瓜冷害指数。
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