聚乙烯醇降解菌酶学特性及降解基因分析

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聚乙烯醇(PVA)是一种性能优良、用途广泛的水溶性高分子聚合物,PVA化学性质稳定,自然条件下不易降解,大量的使用和消耗已经对生态环境造成污染。利用微生物降解PVA是一种经济高效的方法,本试验以分离得到的PVA降解菌HK1为研究对象,对该菌PVA降解酶的产酶条件和酶解条件进行优化,并初步分析该菌株降解基因,为生物降解PVA提供新的菌种资源,为该菌的开发利用和降解机理研究提供参考和依据。主要研究结果如下:(1)菌株生理生化试验和16S rRNA基因鉴定确认HK1为解淀粉芽孢杆菌。(2)无色透明圈试验和菌体酶活分布试验表明菌株HK1主要产生胞外PVA降解酶。(3)单因素试验和正交试验方法相结合优化菌株HK1的产酶条件,所得最优营养组合为:装液量50 m L/250 mL,接种量6%,PVA浓度2.5 g/L,NH4NO3 0.6 g/L,FeSO40.05 g/L,MgSO4 0.70 g/L,CaCl2 0.05 g/L,酵母粉2.5 g/L,培养温度和培养液pH分别为30℃和7.0。经验证试验证明该菌株在此条件下的产酶活性较之前提高了125%。(4)通过研究影响PVA降解酶酶解活性的若干主要因素,确定菌株HK1所产降解酶的适宜酶解条件为:PVA浓度1.5 g/L,温度30℃和pH 7.0。(5)基于菌株HK1全基因组测序数据,初步分析了与PVA降解作用相关的基因,包括具有醌蛋白乙醇脱氢酶结构域的膜蛋白基因、alpha/beta水解酶基因和乙醇酸脱氢酶基因。
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