目前研究证实ALDH1可作为多种肿瘤干细胞的标志，但ALDH1能否作为卵巢癌干细胞标志国内外研究较少且存在争议，尚需更多研究证明。本研究以卵巢癌SKOV3细胞为研究对象，研究ALDH1在卵巢癌中作用。利用无血清悬浮球培养法诱导SKOV3细胞成悬浮球体，富集干细胞。利用MTT法、平板克隆实验及Transwell侵袭实验检测悬浮细胞球的增殖、克隆、侵袭能力；Hoechst33342染液和Aldefluor染液双染法进行荧光染色，荧光共聚焦显微镜下观察ALDH1在卵巢癌SKOV3细胞内的表达情况；通过流式细胞技术检测卵巢癌SKOV3细胞和悬浮球中ALDH1、CD133表达情况；体外化疗实验富集ALDH1^high细胞初步探索ALDH1在卵巢癌细胞中的作用。为ALDH1作为卵巢癌功能性标志物提供证据。研究结果表明：卵巢癌SKOV3细胞接种于无血清培养基中大部分细胞死亡，只有少数细胞悬浮生长，3⁴天可以形成结合疏松、形态不规则，细胞数量较少的悬浮球，6⁷天悬浮细胞球形态变得规则，细胞结合紧密，状态较好，此时的细胞球经胰蛋白酶消化为单个细胞后可用于后续实验； MTT生长曲线结果显示悬浮细胞球和SKOV3细胞的增殖能力在第1²天无差异，从第3天开始悬浮细胞球增殖能力高于SKOV3细胞，差异有统计学意义（P<0.05）。平板克隆实验结果：悬浮细胞球和SKOV3细胞的克隆形成率分别为35.23±5.89%、20.32±6.42%，2组细胞克隆形成率差异有统计学意义（P<0.05）；Transwell侵袭实验结果表明悬浮球穿过膜数为237±30.42，SKOV3细胞穿膜数为87.8±32.13，差异有统计学意义（P<0.05）。荧光化学染色法显示ALDH1定位表达于SKOV3细胞的胞浆，且在SKOV3细胞中ALDH1表达强弱程度不一，ALDH1活性越高，经其作用后产生的荧光底物越多，细胞胞浆显示的荧光就越强；经Hoechst33342和Aldeflour双染后，SKOV3细胞轮廓清晰，胞浆区和细胞核区荧光强弱对比明显，SKOV3细胞核经Hoechst33342染色后显示为蓝色荧光，而ALDH1^high细胞核不被染色；流式细胞仪检测ALDH1^high细胞在卵巢癌SKOV3细胞中比例很低，仅占4.08±0.29%，CD133⁺细胞比例为1.21±0.34%，这符合肿瘤干细胞比例低的特性；而无血清悬浮细胞球培养可使ALDH1^high细胞、CD133⁺细胞富集，悬浮细胞球中ALDH1^high、CD133⁺细胞比例分别为22.42±2.42%和10.34±1.17%，明显高于SKOV3细胞，差异有统计学意义（P<0.05）；体外化疗实验表明顺铂连续作用于卵巢癌SKOV3细胞72小时后ALDH1^high细胞比例增高为17.25±3.26%，增加了3.23倍，CD133⁺细胞比例为4.04±0.86%，增加了2.34倍，说明了ALDH1^high细胞、CD133⁺细胞具有更强的生存能力，而ALDH1low细胞及CD133—细胞者则不具备。结论：1． ALDH1^high细胞和CD133⁺细胞在卵巢癌中所占比例低，分别为4.08±0.29%和1.21±0.34%。2． ALDH1^high细胞和CD133⁺细胞在悬浮细胞球及顺铂作用后得到富集。3．悬浮细胞球中ALDH1^high细胞比例是CD133⁺细胞比例的2倍以上。4． ALDH1可作为卵巢癌干细胞标志物。