我国学者首次应用三氧化二砷（arsenic trioxide，As₂O₃）在临床上治疗常规化疗耐药的顽固性急性早幼粒白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）并取得了满意的疗效。近年来，国内外许多研究表明：在体外细胞实验中，As₂O₃对恶性淋巴瘤、神经细胞瘤、多发性骨髓瘤、前列腺癌、大肠癌和胃癌等多种实体肿瘤均可通过诱导细胞凋亡而抑制肿瘤细胞的生长。但由于使用较高浓度所带来的毒性副作用而限制了As₂O₃在临床上的广泛应用。肿瘤组织中常常有大量的炎性巨噬细胞的浸润，可产生诸如过氧化氢（hydrogen peroxide，H₂O₂）、超氧阴离子（superoxide anions）、氢氧根（hydroxyl radicals）等活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）。因此，肿瘤组织常常处于氧化应激中，维持在一个较高水平的氧化还原平衡状态。低剂量的ROS，特别是在H₂O₂的刺激下，可通过激活包括磷脂酰肌醇3—激酶（Phosphoinositide 3-kinase，PI3-K）在内的多条生存信号通路，促进有丝分裂，引起细胞增殖。是否低浓度的H₂O₂可干扰As₂O₃诱导肿瘤细胞的凋亡，降低As₂O₃的疗效?实体肿瘤细胞中高水平的氧化还原状态是否是肿瘤细胞对As₂O₃产生耐药性的一个原因?H₂O₂激活的生存信号通路中是否存在起关键作用的信号分子? 本研究以来源于人类伯基特氏淋巴瘤细胞株Raji为模型，利用细胞和分子生物学手段，从细胞形态、DNA水平和蛋白质等不同水平探讨H₂O₂对As₂O₃抗肿瘤作用的影响及其信号转导机制。 研究发现，l陆床治疗量的^5203（2林mo比，5林mo比和10林mo讥）可通过诱导肿瘤细胞发生剂量依赖性的凋亡;预处理低浓度的HZOZ（200林m。讥）后，明显的抑制了AsZO3诱导恶性淋巴瘤细胞凋亡，并将细胞死亡方式由凋亡转变为核固缩性坏死为主。这种细胞死亡方式的改变有着重要的生理学意义，早期凋亡细胞可被单核一巨噬细胞识别并吞噬，而核固缩性坏死细胞则不能。这种生理学上的差异导致在HZO:存在的情况下，死亡细胞只有当胞内容物渗入细胞外时，才能被巨噬细胞识别并吞噬，从而导致继发性炎症反应。这可能导致维持慢性炎症，进一步干涉AsZO3的抗肿瘤作用。同时，研究证实:HZO:抑制AsZO3诱导的肿瘤细胞凋亡的效应可被PI3一K特异性抑制剂所抑制，恢复细胞凋亡。表明PI3一K存活信号通路在HZq抑制AsZo3诱导的肿瘤细胞凋亡中发挥着关键性作用。 本研究进一步探讨了HZO:刺激下PI3一K存活信号通路的下游靶信号分子。发现低浓度的HZO:通过依赖PI3一K的方式对抗AsZO3诱导的casPase一3激活，下调抗凋亡蛋白Bd一XL和上调凋亡分子Bax的表达及依赖PI3一K信号上调抗凋亡蛋白Bd一2的表达;同时，PI3一K特异性抑制剂可抑制低浓度的HZO:诱导的Bd一2和I出a的磷酸化及核因子一KB （nuclear facto卜KB，NF一KB）的核转位;而HZo:诱导的细胞外调节激酶（extraeenular regulated kinase，ERK）激活和对p38丝分裂原活化蛋白激酶（Mitogen一aetivated protein kinases，p38MAPK）的抑制是不依赖pI3一K信号分子的。以上结果表明:HZo:诱导的上调抗凋亡蛋白Bd一2、Bd一XL和下调凋亡分子Bax，Bd一2和kBa的磷酸化，抑制NF一KB核转位及casPase一3活性可能是PI3一K存活信号通路的下游信号分子;而ERK和p38MApK与PI3一K存活通路无直接关系。 综上所述，低浓度HZO:可通过PI3一K介导的调节Bd一2家族抗凋亡蛋白和促凋亡分子的表达，并激活Bd一2和IKBa的磷酸化，抑制N下一KB核转位及casPase一3活性而对抗AsZO3诱导的恶性淋巴瘤细胞凋亡，促进细胞存活。