辅因子与内源质粒对维生素C发酵生产的影响

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skycat
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文以普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare) WSH-001和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) WSH-002的混合菌系为生产菌株,以强化二步发酵法生产维生素C过程中2-酮基-L-古龙酸(2-keto-L-gluconic acid,2-KLG)的高效生产和揭示两菌关系为目标,研究了稀土元素与B. megaterium为源质粒对2-KLG合成的影响。主要研究结果如下:1.通过在发酵培养基中添加不同稀土离子及稀土元素配合物,研究了稀土元素对2-KLG合成的影响,并以效果最为显著的La3+为对象进行了深入研究。结果表明,不同稀土离子在低浓度下(≤5 mmol/L)对2-KLG的合成代谢均有一定促进作用;EDTA镧、柠檬酸镧均抑制2-KLG的合成,而1mmol/L的草酸镧能轻度提高2-KLG的产量(6.4%);在摇瓶中添加5mmol/L的La3+,发酵中后期菌体生长状况得到了显著改善,同时提高了2-KLG的最终产量,并缩短了发酵周期,分析产生这一结果的主要原因是La3+抑制2-KLG还原酶的活性,从而减少了2-KLG的降解。在发酵罐(3.6 L)中添加5mmol/L的La3+进行分批发酵,平均山梨糖消耗速率和2-KLG生产强度相比于对照分别提高了12.4%和14.8%,发酵周期缩短了11.1%。2.根据基因组测序结果,B. megaterium WSH-002中含有3个野生型质粒pBM-001、pBM-002, pBM-003,大小分别为74,613 bp,9,699 bp和7,006 bp,分别含有69、11、14个开放读码框(Open Reading Frame, ORF)。为了研究B. megaterium WSH-002内源质粒对2-KLG合成的影响,分别采用逐级升温处理法、温度和SDS交替处理法以及吖啶橙处理法对其进行了质粒消除。结果采用温度和SDS交替处理法筛选得到了两株不同的质粒部分消除衍生株D1(消除质粒pBM-001)和D13(消除质粒pBM-001和pBM-003)。最后采用吖啶橙处理法筛选得到了质粒完全消除衍生株D123。3.比较了筛选得到的三个不同质粒消除衍生株D1、D13、D123与出发菌株B.megaterium WSH-002的形态、生长特征以及分别与K. vulgare搭配后的产酸情况。结果发现,三株不同质粒消除衍生株的形态特征和生长特征与出发菌株无显著差异,说明这些质粒不是B. megaterium WSH-002生长所必须的。分别与K. vulgare搭配得到混菌体系后进行产酸比较结果表明pBM-002和pBM-003对2-KLG的合成具有重要的影响,而质粒pBM-001对2-KLG的合成几乎没有影响。根据B. megaterium WSH-002测序结果对其三个内源质粒上所有预测的96个ORF进行了COG功能分类和蛋白比对,发现WSH-002的质粒特别是pBM-002和pBM-003上存在大量未知功能蛋白或在数据库中找不到同源的蛋白。说明B. megaterium WSH-002野生型质粒的功能具有一定特殊性。
其他文献
在当前建筑工程发展过程中,施工质量监督和施工技术管理作为非常重要的两项内容,对于建筑工程的质量具有直接的影响,一旦建筑工程质量监督中的技术管理存在问题,则会给人们带
随着知识经济时代的到来,培养适应新世纪发展的创新人才已成为世界各国教学改革的重要内容.本文从心理学教学入手,探讨了如何创设条件,培养学生的创新意识和创新能力.
上调基因11(URG11)是一种可以被乙型肝炎X抗体反式激活的癌基因,其与HBV感染相关性肝癌、胃癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌等恶性肿瘤的发生发展及预后密切相关,对恶性
在全球化的大背景下,国家对外交往合作需要语言方面的人才,中外合作办学应运而生。虽然自20世纪80年代起,中外合作办学已经取得很大的成果,但因为缺乏实践,中外合作办学的教
目的对痰瘀同治理论用于治疗老年风温肺热病肺热壅肺证型进行临床观察。方法对60例老年风温肺热病肺热壅肺证患者按随机数字表法随机分组,治疗组30例予中药宣肺泄热化痰祛瘀
21世纪是互联网的世界,伴随着我国市场经济的快速发展和人们生活节奏的加快,公众在文化领域的消费也趋向于“快餐式”的消费方式。而移动通讯技术和数字技术的快速发展、以及
根据非稳态超声检测信号的特点,将小波包变换用于缺陷信号的降噪及特征提取问题的研究,并利用类别可分性判据和RBF神经网络分别对特征值提取结果进行评价。引入了平均阈值的概
将国有偏向型政策和出口偏向型政策这一"双重偏向型政策",嵌入企业异质性贸易模型,构建包含私有和国有两类企业的产业内资源误置与贸易模型,分析表明:双重偏向型政策导致在国
本文以具体的实验论证了自然界中氧气和二氧化碳循环过程,以培养学生理解自然界中氧气能周而复始、不断再生的原理.
目的探讨生蒲黄汤辨证治疗眼底出血患者疗效及对患者眼底出血吸收、纤溶状态的影响。方法选择我院2014年2月—2017年2月收治的眼底出血患者60例,按照随机数字表法分为对照组(3