PDE在小鼠受精卵早期发育过程中活性变化及PDE3A在小鼠卵巢组织内分布的研究

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作为第二个信使的cAMP的发现对我们研究关于信号转导和激素作用机制铺平了道路。激素通过与G蛋白偶联的受体结合影响合成cAMP的腺苷酸环化酶(AC),环核苷酸随后结合和激活蛋白激酶和转录因子。现已知蛋白激酶A(PKAs)不是细胞内唯一cAMP的效应器。环核苷门控通道和cAMP调节的氨基鸟苷酸转换因子((cAMP—GEFsorEPACs)是环核苷酸信号通路分支。磷酸二酯酶(PDEs)是水解cAMP和和cGMP的酶使第二信使失活。PDEs与磷蛋白磷酸酶一起是在信号通路中起负性作用,并且信号终止被认为是他们惟一作用。近年来,关于细胞周期调控的研究引起学者的广泛关注。因受实验材料数量的限制,有关细胞周期调控机制的研究多是以相对容易大量获取的无脊椎动物或两栖类动物卵、体细胞等为实验对象进行的。而在高等哺乳动物卵的早期发育机制方面研究极为有限。 鼠是与人类比较接近的哺乳动物,给我们提供了良好的哺乳动物模型,因此研究鼠受精卵的发育对了解哺乳动物受精卵发育信号传导机制有重要意义实验技术的进步终于使我们能够以有限的小鼠受精卵为对象,进行有关磷酸二酯酶(PDE)活性变化规律的研究,这将有助于解明哺乳动物(包括人在内)的细胞周期调控机制。已知体内受精发生在注射hCG后大约11h左右,为我们利用鼠受精卵进行有关细胞周期调控的研究提供了实验时间上的依据。 有研究报道在哺乳动物至少存在11个不同基因编码的磷酸二酯酶家族。大鼠和小鼠卵母细胞主要PDE形式是PDE3A且发现PDE的特殊抑制剂在体外和在体内阻止卵母细胞成熟,因此证实了此酶在卵母细胞减数分裂的阻滞中的重要作用。实验已证实在卵母细胞的中随着PDE活性的升高,当升高到一定数值时即达到一定阈值,卵母细胞减数分裂由阻滞到恢复,但在受精卵中未见相关报导。本实验第一次对在小鼠受精卵一细胞期中的PDE和MPF活性进行检测,并用免疫组化方法对PDE3A在小鼠卵巢组织中的表达进行了研究。
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