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背景与目的卵巢癌的死亡率居妇科恶性肿瘤之首,提高恶性卵巢肿瘤患者的生存,特别是上皮性卵巢癌(EDC),寻找铂类药物的替代治疗上皮性卵巢癌药物迫在眉睫。近年来,随着蛋白酶体抑制剂硼地佐米应用于多发性骨髓瘤及套细胞淋巴瘤等疾病并取得良好效果,泛素化蛋白酶抑制剂逐渐成为癌症治疗新靶点。在目前的研究中,铂羟基吡啶硫酮(PtPT),一种新型的铂金属离子配合物,可以通过抑制蛋白酶体功能,在肺癌细胞及白血病细胞中表现出比顺铂更大的和更有选择性细胞毒性。而且体内体外均未表现出显著的DNA损伤效应,引起了我课题组广泛关注。在本次课题中,我们发现PtPT通过对泛素蛋白酶体抑制,在体内和体外均可一定程度诱导A2780和SKOV3细胞株的生长。这些研究为PtPT在上皮性卵巢癌的临床治疗中提供了扎实的前期基础,,我们猜想,PtPT可能是治疗卵巢癌的极具潜能的新药物。在课题组前期实验中,我们以具有良好生物活性的2-巯基吡啶氮氧化物为配体,合成一种具有潜在抗癌活性的新型金属配合物PtPT。并在其体内外抗肺癌效应及相关机制进行初步研究,我们发现PtPT通过选择性的抑制26S蛋白酶体相关去泛素化酶UCHL5及USP14活性从而选择性的抑制包括肺癌在内的多种恶性肿瘤细胞生长。而去泛素化酶UCHL5和USP14在卵巢肿瘤中表达明显高于正常组织,甚至可作为预测预后的指标之一,因此,我决定进一步探讨铂金属配合物PtPT在卵巢肿瘤治疗中的应用及相关作用机制。方法与结果通过MTS实验我们发现,PtPT可选择性诱导卵巢癌细胞死亡,并且表现出比顺铂更敏感的肿瘤细胞杀伤作用,通过细胞周期流式检测我发现PtPT可诱发A2780和SKOV3发生G2/M周期阻滞,结合Western bloting检测结果,我们发现PtPT可诱导卵巢癌细胞发生内质网应激、线粒体膜电位下降、casepase激活等多种途径诱导细胞凋亡,同时casepase通路抑制剂Z-vad可以大部分逆转PtPT诱导的细胞死亡,进一步表明细胞凋亡依赖casepase通路激活。我们进一步研究了作用机制,Western Blot结果显示PtPT可诱导卵巢癌细胞泛素化蛋白的聚集,且早于诱导凋亡之前,提示PtPT可能通过抑制卵巢癌细胞泛素化蛋白酶体功能从而引起泛素化蛋白的聚集来发挥抑制增殖和抗凋亡效应。在A2780和SKOV3细胞裸鼠移植瘤动物模型的实验中,我们发现PtPT既可显著抑制肿瘤组织的生长,同时对实验动物体重机能无影响。Western Bloting提示PtPT可引起裸鼠卵巢肿瘤中泛素化蛋白表达上调和PARP切割,casepase激活。免疫组化结果进一步验证PtPT可引起卵巢癌组织泛素化蛋白Ub、K48、Bax的聚集以及Caspase-3的活化,这提示PtPT可能通过诱导蛋白酶体功能抑制引起卵巢癌组织细胞凋亡。结论1.新型铂金属离子配合物PtPT通过抑制泛素蛋白酶体功能在体外发挥抗卵巢癌效应。2.新型铂金属离子配合物PtPT通过抑制泛素蛋白酶体功能在体内抑制卵巢癌生长。