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目的多囊卵巢综合征（Polycystic ovarian syndrome，PCOS）是育龄妇女最常见的内分泌紊乱性疾病之一，以雄激素过多与持续不排卵为主要特征，发病率占不孕妇女的5％～21％，占不排卵妇女的75％～80％。1935年Stein和Leventhal首先报道一组以闭经、肥胖、多毛、不孕及双侧卵巢呈多囊性增大为主要表现的综合征，因其病理生理学改变范围非常广泛，涉及遗传、神经内分泌、糖代谢、脂肪代谢、蛋白质代谢以及卵巢局部调控因素等的异常变化，对其研究至今仍是妇科内分泌领域研究的热点之一。研究表明，某些卵巢局部调节因子的功能紊乱是PCOS发病的重要环节。白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是两种重要卵巢局部调节因子，其中，LIF在PCOS卵巢组织中的表达报道甚少，bFGF在PCOS卵巢组织中的表达国内外未见报道。LIF为白介素6（interlukin-6，IL-6）家族中的一员，是一种高度糖机化的分泌型蛋白，具有广泛的生物学功能，LIF在生殖方面可促进卵泡的生长发育、排卵，胚胎的生长、发育、分化、着床等。bFGF是多肽生长因子，具有广泛生物学活性，在生殖方面，调节卵泡的发育与选择，促进排卵和胚胎发育等。本研究利用来曲唑建造PCOS大鼠模型，通过动情周期变化，血清性激素测定和卵巢解剖学及组织学变化来评定模型。借助免疫组化方法观察LIF和bFGF在PCOS大鼠卵巢中的表达，探讨LIF和bFGF在PCOS发病机制中的作用。材料与方法1．研究对象选6周龄清洁级SD雌性大鼠60只，有4天的规律动情周期，由郑州大学医学院实验动物中心[生产许可证号：SCXK（豫）2005-0001]提供，随机分为三组：实验组、实验对照组和空白对照组，各20只。2．方法2．1 PCOS模型的建立：实验组灌胃服用来曲唑1mg／kg／日，溶于1％羧甲基纤维素（carboxmethlycellulose，CMC）中；实验对照组灌胃服用1％CMC；空白对照组正常饲养。连续灌服23天，此期须每日监测大鼠动情周期有无变化。2．2标本采集：在最后一次应用来曲唑24h（并禁食12h）后，缺血法致死，取血5ml，2000r／min离心10min，收集血清，-40℃冻存备用；取出卵巢、子宫，分别称重并记录后，将其全部以10％福尔马林固定备用。2．3卵巢组织学检查：以卵巢最大平面作为待检平面行石蜡包埋，每个石蜡块分别以4μm厚度切片，行HE染色。2．4血清性激素测定：应用RIA测定促黄体生成激素（luteinizing hormone，LH）、促卵泡激素（follicle stimulating hormone，FSH）、雌二醇（estradiol，E2）、泌乳素（Prolactin，PRL）、睾酮（testoterone，T），以评定模型大鼠的内分泌改变。2．5卵巢组织中LIF和bFGF的表达：应用免疫组化法，借助Biosens DigitalImaging System测灰度值。3．统计学处理采用SPSS11.5统计软件进行统计学处理，多组均数之间的比较进行单因素方差分析，数据均以（?）±s表示。P＜0.05有统计学意义。结果1．PCOS大鼠模型评价1．1动情周期的变化：实验组在应用来曲唑12天后动情周期失去规律性变化，提示无排卵；两对照组保持规律的动情周期。1．2卵巢、子宫解剖学及组织学改变：实验组卵巢重量显著高于实验对照组及空白对照组（P＜0.05）；解剖学观察卵巢表面较苍白，体积增大，可见较多囊状扩张的卵泡；组织学检查显示有较多早期发育的小卵泡和闭锁卵泡，囊状扩张卵泡明显增加，颗粒细胞层减少至2～3层，卵泡内卵母细胞或放射冠消失，卵泡膜细胞和间质细胞的数量增多，黄体数量明显下降并伴有不完全的黄素化。实验组子宫重量显著低于实验对照组及空白对照组（P＜0.05）。1．3血清性激素水平：实验组血清LH，PRL，T浓度显著高于实验对照组及空白对照组（P＜0.05）；FSH，E2浓度显著低于实验对照组及空白对照组（P＜0.05）。2．卵巢组织中LIF和bFGF的表达LIF和bFGF在大鼠卵巢的间质细胞、颗粒细胞和卵泡膜细胞中均有表达。实验组LIF在间质细胞、颗粒细胞和卵泡膜细胞上的表达强度显著低于实验对照组和空白对照组（P＜0.05）；实验组bFGF在卵泡膜细胞的表达强度显著高于两个对照组（P＜0.05）。结论1．应用来曲唑（非甾体类芳香化酶抑制剂）所制备的PCOS大鼠模型，是一种理想的PCOS模型，可靠性强；它优于目前国内惯用的PCOS模型。2．LIF和bFGF在卵巢组织中的表达与PCOS的发病密切相关。