【摘 要】
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目的:应用真核表达载体HSV-1载体和能够表达小干扰(siRNA)的慢病毒载体作为表达载体,构建了大鼠MeCP2基因反义表达载体,并对相应载体系统包装及其介导外源基因在体外培养细胞
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目的:应用真核表达载体HSV-1载体和能够表达小干扰(siRNA)的慢病毒载体作为表达载体,构建了大鼠MeCP2基因反义表达载体,并对相应载体系统包装及其介导外源基因在体外培养细胞中的表达作用进行探讨.结论:本实验成功构建了大鼠MeCP2基因HSV-1型反义RNA表达载体的;无辅助病毒的HSV载体包装系统,能够使HSV-1载体形成有效的病毒颗粒,具有TH-NF嵌合启动子的HSV-1载体可以在体外培养神经元中持续稳定地表达外源基因.本实验成功构建了基于慢病毒载体的大鼠MeCP2基因siRNA表达载体,为以RNAi技术研究MeCP2基因在脑神经元发育中的功能打下了基础;慢病毒载体系统包装后可以产生有效的病毒颗粒,并在293T细胞、PC12细胞和培养神经元表达外源基因,表明借助于该载体系统以RNAi技术研究MeCP2基因功能是具有可行性的.
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