木薯(Manihot esculenta Crantz)是一种具有饲用、工业利用等价值的重要经济作物。木薯细菌性枯萎病是影响我国国内木薯产量的第一大木薯病害,因此,发掘木薯中可能参与抗病抗逆的相关基因,对培育木薯抗病新品种提高木薯产量有很大的意义。核因子Y(nuclear factor-Y,NF-Y)作为转录因子在植物的生长发育和胁迫应答中起着重要作用,NF-Y可以分为三类亚基分别是NF-YA,NF-YB和NF-YC,并且能够形成异源三聚体,然而,它们在木薯中的功能作用仍是未知的。在该研究中,我们全面鉴定了1 5个MeⅣF-YAs,21个MeNF-YBs和15个MeNF-YCs;在木薯响应地毯草黄单胞菌(Xanthomonas axonopodis pv.manihotis,Xam)时进行了基因表达测定以分析MeNF-Ys的转录表达谱;利用蛋白质-蛋白质互作实验的方法鉴定异源三聚体NF-Y转录因子复合物;通过在木薯中利用病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)的方法揭示了MeNF-Ys在木薯中的作用。获得以下主要结果:(1)在本研究中,检测了木薯NF-Y三个亚基的基因家族在Xam处理后的表达谱,从这三大基因家族中各挑选出2个MeNF-Y(MeⅣF-YA1、M MeNF-YB16、MeNF-YC11和MeNF-YC12),克隆了这6个基因的全长并进行亚细胞定位分析,发现这6个基因的蛋白定位在细胞核中。(2)利用蛋白质-蛋白质互作实验验证木薯NF-Y异源三聚体的蛋白互作,结果证明筛选出的NF-Y三类亚基在木薯中形成了异源三聚体NF-Y转录因子复合物,即MeNF-YA 1/3&MeNF-YB1 1/16&MeNF-YC11/12,且该转录复合体能够结合启动子区的CCAAT框并赋予其转录活性。(3)通过这6个基因在烟草中过量表达,发现过表达的MeⅣF-YA1、MeNF-YA3、MeNF-YB11、MeNF-YB16、MeNF-YC11和MeNF-YC12提高了烟草对 Xam 的抗性。另一方面在 VIGS 体系中,MeNF-YA1/3,MeNF-YB11/16或者MeNF-YC11/12被抑制表达,降低了木薯对Xam的抗性,尤其是在基因共同抑制表达的植株中,说明异源三聚体NF-Y转录因子复合物对植物抗病性具有正向调节作用。在基因抑制表达的植株中,发现MePRs基因的表达量下降,而且分析了该转录复合体可能是木薯中MePRs的转录激活物,并且在木薯的抗病反应中发挥着重要作用。综上所述,我们鉴定了木薯中NF-Y转录因子复合物(MeNF-YA1/3&MeNF-YB1 1/16&MeNF-YC 11/12)及其对MePRs启动子的转录激活,有助于抗病木薯的遗传育种研究。