【摘 要】
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目的:检测逼尿肌组织缝隙链接蛋白43(Connexin43,Cx43)在豚鼠糖尿病膀胱(Diabetic cystopathy,DCP)中的分布及表达情况,研究Cx43在糖尿病膀胱形成中的作用。方法:2-3月龄健康雄性豚鼠60只,随机分为实验组(n=40)、正常对照(normal control,NC)组(n=20)。实验组豚鼠单次腹腔注射溶于p H4.4、浓度0.1mmol/L枸橼酸钠的链脲佐菌
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目的:检测逼尿肌组织缝隙链接蛋白43(Connexin43,Cx43)在豚鼠糖尿病膀胱(Diabetic cystopathy,DCP)中的分布及表达情况,研究Cx43在糖尿病膀胱形成中的作用。方法:2-3月龄健康雄性豚鼠60只,随机分为实验组(n=40)、正常对照(normal control,NC)组(n=20)。实验组豚鼠单次腹腔注射溶于p H4.4、浓度0.1mmol/L枸橼酸钠的链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导建立糖尿病豚鼠模型,利用尿动力学检测筛选出糖尿病膀胱豚鼠纳入DCP组(n=10),未形成糖尿病膀胱豚鼠纳入NDCP组(n=10);NC组(n=10)豚鼠单次腹腔注射枸橼酸钠溶液。HE染色观察DCP组、NDCP组和NC组三组膀胱逼尿肌组织病理学变化,通过免疫荧光染色法观察Cx43在三组膀胱逼尿肌中的定位及分布,采用Western blot技术检测三组膀胱逼尿肌组织内Cx43蛋白的表达。结果:HE染色发现:DCP组豚鼠膀胱逼尿肌肌束形态相对不规则,各肌纤维之间间距增宽且分布稀疏,可见疏松纤维结缔组织数量增加且呈无序不规则排列。NDCP组和NC组豚鼠膀胱逼尿肌肌束形态规则,肌纤维排列紧密有序。免疫荧光染色结果显示:逼尿肌组织细胞膜和细胞质内Cx43被标记荧光特异染为红色,表明Cx43主要表达在细胞膜和细胞质中,细胞核上未见Cx43表达。DCP组豚鼠逼尿肌组织Cx43荧光染色强度明显低于NDCP组和NC组。NDCP组和NC组之间阳性染色强度对比无明显差异。Western blot检测发现,DCP组膀胱组织Cx43蛋白表达(0.52±0.02)低于NC组(0.68±0.02)和NDCP组(0.70±0.01)(P<0.01),NDCP组与NC组膀胱组织Cx43蛋白表达对比,差异无统计学意义(P>0.01)。结论:DCP膀胱逼尿肌Cx43表达明显减少,Cx43的表达降低或许是导致DCP发病的重要因素之一。
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