菲牛蛭(Hirudinaria manillensis Lesson)隶属无吻蛭目，是一种珍贵的医用水蛭。本论文主要对我国华南地区菲牛蛭养殖生态学、生化成分及其抗凝血酶活性进行了研究。 在菲牛蛭繁育过程中，密度、季节、温度、体重、年龄和应激刺激等因素能对菲牛蛭亲本的性腺发育和繁殖效率产生重要影响。本文研究了上述6个因子对亲蛭繁殖的影响。在季节和密度实验中，分为秋冬和春夏2个季节，分别设置4个(5、20、30和50尾/箱(0.05m3土层))和7个密度梯度(5、10、15、20、25、30和50尾/箱(0.05m3土层))；结果表明在不同季节下，产茧率、产茧数、孵化率和孵化数等繁殖指标有明显差异，其中，春夏季节孵化时间短于秋冬季节，而产茧数和孵化数高于秋冬季节；当繁殖密度为5-10尾/箱时，亲蛭的繁殖效率最高，当繁殖密度为50尾/箱时，亲蛭的繁殖效率最低，而且亲蛭死亡率高，具有明显抑制作用。在交配和卵茧孵化实验中，首先研究温度对水体和土壤中生活菲牛蛭交配率的影响，设置7个温度梯度(室温、24，26，28，30，32和34℃)；结果表明菲牛蛭在土壤中的交配率要明显高于水体环境，其最佳交配温度是28-30℃；另外研究茧重和温度对菲牛蛭卵茧孵化的影响，设置茧重处理5组(小于0.6g，0.6-1.0g，1.0-1.5g，1.5-2.0g，大于2.0g)和孵化温度处理6组(22，24，26，28，30和32℃)；结果表明茧重1.0-2.0 g时具有最高孵化数和孵化率，最适孵化温度为26-28℃。在体重、年龄和应激刺激实验中，设置亲蛭体重处理3组(5-10 g、10-15 g和15-20 g)，蛭龄处理3组(8月龄、2年龄、3年龄和4年龄)和应激处理3组(操作应激1次、2次和3次)；结果表明10-15 g亲蛭具有最高的性腺系数和繁殖效率，2-3年龄亲蛭具有最佳的产茧数和产茧率，繁殖过程中适宜的应激刺激(1-2次)能促进亲蛭产茧，提高繁殖效率。商品菲牛蛭养殖过程中，研究了3种微生态制剂对菲牛蛭养殖水体的净化效果，几种中草药和抗生素制剂对菲牛蛭细菌性疾病治疗作用和3种常用水产消毒剂对菲牛蛭的急性毒性作用。在水体净化实验中，设置硝化细菌、光合细菌和EM-复合菌3个处理，结果表明3种微生态制剂在15天内均能较好的稳定水体pH，增加溶解氧DO含量，明显降低COD、NH4+-N和NO2-N，并大大提高菲牛蛭成活率，其中以EM复合菌效果最佳。疾病治疗实验中，设置5种中草药(板蓝根、陈皮、穿心莲、三黄和车前草)和3种抗生素制剂(诺氟沙星、环丙沙星和土霉素)，结果表明5种中药制剂中板蓝根治疗效果最好，陈皮的治疗效果次之，三黄和车前草有一定治疗效果，而穿心莲无治疗效果，且对菲牛蛭有一定的毒害作用；同时证明诺氟沙星、环丙沙星和土霉素等3种抗生素药物对菲牛蛭细菌性疾病均具有很好治疗效果。急性毒性实验中，设置3种消毒剂(强力碘、杀菌水和灭毒威)，实验结果表明菲牛蛭对3种消毒剂药物的敏感性依次为：强力碘＞灭毒威＞杀菌水，杀菌水是菲牛蛭较理想的疾病防治药物，灭毒威使用时要准确掌握用量，菲牛蛭对强力碘极为敏感，不宜作为其疾病防治的药物。 幼蛭培育过程中重点对其人工饲料进行研究，同时探讨了密度、温度、饵料、季节、初始体重、孵化温度、饵料组合及其投喂频率等因子对幼蛭摄食、生长和成活的影响。在诱食剂筛选实验中，设置10个处理(精氨酸、甘氨酸、L-丙氨酸、甜菜碱、腺苷酸、鸟苷酸和尿苷酸及其4种复合制剂)，结果表明3种氨基酸、鸟苷酸和尿苷酸促摄作用显著，而腺苷酸、甜菜碱和3种复合制剂无诱食作用。探讨饲料中5种添加营养成分和不同浓度柠檬酸对幼蛭培育效果时，设置黄芪、三黄、板蓝根、EM复合菌和利多酶等5种成分和0.1，0.2，0.3和0.4％的柠檬酸，结果表明5种饲料均能明显改善幼蛭摄食，增加摄食量，提高摄食效率，促进幼蛭生长，提高其成活率，其中以复合酶利多酶和益生菌EM复合菌效果最佳；同时饲料中添加0.1-0.2％柠檬酸，能显著刺激菲牛蛭幼蛭摄食，促进幼蛭生长，提高成活率。饵料组合及其投喂频率对幼蛭培育影响实验中，天然饵料设置6个处理(16，12，8，6，4和3次/120天)，人工饲料设置5个处理(16，12，8，6和4次/120天)，并比较人工饲料、天然饵料及其组合投喂下幼蛭培育效果； 实验结果表明天然饵料最佳投喂频率为1次/15 d，人工饲料最佳投喂频率为1次/7 d，同时表明饵料组合投喂可显著降低饵料系数，获得较快生长速率和高成活率。在养殖密度、温度、饵料、季节、初始体重和孵化温度等因子对幼蛭培育影响及其安全越冬实验中，设置5个密度(100，200，250，300和400尾/箱)，7个温度(室温，20，24，28，30，32和34℃)，4种饵料(新鲜牛血、活体牛蛙、饲料NP-2002a和饲料NP-2002b)，秋冬和春夏2个季节，越冬期4种实验措施，3个初始体重组(Ⅰ(＜0.04 g)，Ⅱ(0.04-0.10 g)和Ⅲ(＞0.10 g))和6个孵化温度组(22，24，26，28，30和32℃)；结果表明幼蛭最佳养殖密度和最适温度分别为100尾/箱和28℃；新鲜牛血和活体牛蛙能促进幼蛭快速生长，而饲料NP-2002a和NP-2002b能保证幼蛭培育中的高成活率，春夏季节的培育效果明显优于秋冬季节，越冬期采取半干保湿或恒温28±0.3℃水体养殖模式能明显提高幼蛭的存活率；初始体重0.04-0.10 g和28℃孵出的幼蛭培育效果最佳。本文对中国常见7种水蛭体内可溶性蛋白进行SDS-PAGE分析，探讨菲牛蛭中水蛭素类抗凝物质提取方法并对不同种类水蛭及野生和养殖菲牛蛭抗凝活性进行比较。结果表明7种水蛭的可溶性表达蛋白组分种类有明显差异，其中日本医蛭最多，达28个，并且吸血蛭类的蛋白数要大于非吸血蛭类，而3种不同产地菲牛蛭间表达蛋白无差异；最佳提取方法是低温下丙酮抽提，抗凝血物质有无与水蛭食性有着直接关系，非吸血蛭类无抗凝活性，而吸血蛭类具有较高抗凝活性，同时人工养殖对菲牛蛭抗凝物质等药用成分无影响。 本研究分析不同地域分布的野生和不同食性的养殖菲牛蛭营养成分，并与其它4种水蛭作比较。结果表明水蛭具有高蛋白和低脂肪，吸血蛭类的氨基酸总含量明显高于非吸血蛭类，并含有丰富的脂肪酸，非吸血蛭类的脂肪酸组分种类明显高于吸血蛭类，但吸血蛭类的不饱和脂肪酸含量明显高于非吸血蛭类，Zn、Mn和Fe元素的含量较高且较合理，有毒元素Pb和Cd含量低；菲牛蛭具有高蛋白和低脂肪，养殖菲牛蛭的不饱和脂肪酸含量明显高于野生菲牛蛭，不含Pb、As和Cd等有害金属。