【摘 要】
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目的:该研究结合该课题组目前掌握的大量SARS相关资源,根据现有的实验条件,并与国内多家实验室合作,进行了以下实验研究,包括:(一)SARS-CoV相关抗体的消长规律;(二)蛋白质印
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目的:该研究结合该课题组目前掌握的大量SARS相关资源,根据现有的实验条件,并与国内多家实验室合作,进行了以下实验研究,包括:(一)SARS-CoV相关抗体的消长规律;(二)蛋白质印迹法(Western Bloting)检测SARS-CoV S蛋白抗原的特异性;(三)荧光定量RT-PCR检测SARS-CoV核酸;(四)SARS-CoV患者抗体库建立的初步工作.另外,正在开展和下一步计划开展的研究包括连续监测SARS患者细胞因子动态变化,临床免疫相关项目追踪,体外病毒诱导人体T淋巴细胞的凋亡,刺激PBMG炎症因子的分泌,激素引起树突状细胞的凋亡和分化,和加快人源化单克隆中和抗体的研制等工作.结论:一、通过对SARS患者不同时期抗体阳性率、抗体浓度变化的动态追踪检测,发现机体受到SARS-CoV感染后,出现相应的免疫应答反应,并产生相应的抗体,包括IgM和IgG,抗体阳性率、浓度随着SARS患者病情发展,和恢复期不同时间段而发生变化,呈现出消长规律,可用于SARS疾病的诊断、判断预后和流行病学调查.二、SARS-CoV的S蛋白是其结合抗体的主要部位,其S1区有抗原决定簇,具有高度的保守性,因此,针对SARS-CoV,克隆出SARS-CoV S蛋白基因,通过真核表达出S蛋白,可以利用SARS患者体内血清中特异性抗体检测出,从而证实其抗原特异性.三、荧光定量RT-PCR检测SARS-CoV核酸,具有较高的灵敏度、特异性,能够缩短临床诊断SARS-CoV感染所用的时间,辅助临床的诊断和预后.四、通过对SARS患者产生抗体规律和特异性的研究,并结合临床使用抗血清进行治疗效果的观察,设计进一步进行基因工程抗体的研制.实验的初步研究进展中,由设计不同的引物,扩增出SARS患者免疫球蛋白重链和轻链的可变区基因,并连接成功,为抗体库的构建和筛选特异性抗体打下基础.
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