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目的：通过对血管性痴呆(Vascular dementia, VD)模型大鼠微管相关蛋白1轻链3(mi-crotubule-associated protein1light chain3, MAP1-LC3，LC3)、自噬相关蛋白Beclin-1、自噬小体、细胞凋亡指数(Apoptotic Index,AI)及血液流变学的观察,研究祛风通窍方对VD大鼠白噬、凋亡及血液流变学的影响,初步探讨祛风通窍方对VD大鼠的保护机制。方法：1)动物分组：健康雄性SD大鼠90只,永久性结扎双侧颈总动脉(2-VO)法制备VD模型,以Morris水迷宫实验作为筛选标准,将符合要求的SD大鼠按随机对照表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组(西药组)、祛风通窍方高剂量组(高剂量组)、祛风通窍方中剂量组(中剂量组)、祛风通窍方低剂量组(低剂量组)各12只。假手术组只分离双侧颈总动脉(Common carotid artery, CCA)不结扎。2)给药：西药组给予尼莫地平6.25mg/kg/d浓度混悬液灌胃,高、中、低剂量组分别予以相当于祛风通窍方生药26.8g/kg/d、13.4g/kg/d、6.7g/kg/d的浓缩液灌胃,假手术组、模型组予以生理盐水灌胃,每天1次,每次3m1,连续喂养30天。3)标本采集：1%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉,仰卧固定,开胸,快速心脏取血(5m1),注入抗凝管内,用于血流变学检测；随机抽取5只大鼠断头处死,取新鲜脑组织PE管中-70℃保存备用；7只大鼠心脏灌注内固定,断头取脑,固定、脱水、包埋制成切片。4)观察指标：Morris水迷宫试验检测VD大鼠学习记忆功能；电镜观察神经元细胞超细微结构：Western Blot法检测自噬相关蛋白LC3表达；免疫组化检测Beclin-1蛋白表达；原位末端标记法(TUNEL法)检测海马神经元AI；流变快测仪检测血液流变学指标。结果：1)Morris水迷宫实验：与假手术组比较,模型组及各药物干预组逃避潜伏期(escape latency, EL)均延长,平台象限停留时间缩短,跨越虚拟平台的次数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,西药组、高、中剂量组EL逐渐缩短,平台象限停留时间延长,跨越虚拟平台次数增加,差异有统计学意义(P<0.05)；低剂量组EL有所缩短,平台象限停留时间有所延长,跨越虚拟平台的次数有所增加,但与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与西药组比较,高剂量组EL缩短,平台象限停留时间延长,跨越虚拟平台次数增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。与低剂量组比较,西药组、高、中剂量组EL缩短,平台象限停留时间延长,跨越虚拟平台的次数增加,差异有统计学意义(P<0.05)。2)电镜结果：电镜观察海马神经元细胞：模型组可见大量空泡,细胞核形态不规则,核膜结构不清,甚者核碎裂,细胞器明显减少,线粒体明显水肿,线粒体嵴双层膜结构不清,甚者固缩坏死；西药组、高、中剂量组细胞核形态规则,核呈圆形,细胞器较丰富,线粒体、内质网轻微水肿,线粒体嵴可见,可见少量溶酶体；低剂量组神经元细胞结构有所改善,但仍可见细胞核固缩碎裂,细胞器减少,线粒体、内质网水肿。电镜观察皮层额叶神经元细胞：模型组细胞核形态不规则,甚者碎裂,细胞器明显减少,线粒体固缩,嵴的双层膜结构消失；西药组、高、中剂量组细胞核圆形,核膜清晰,细胞器较丰富,线粒体、内质网略显水肿,溶酶体明显。低剂量组与模型组比较有所改善,但仍见细胞核固缩,细胞器减少,线粒体、内质网水肿。海马及皮层均未见自噬小体结构。3)LC3蛋白检测：与假手术组比较,模型组及各药物干预组LC3蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各药物干预组LC3蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,高剂量组LC3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；中剂量组LC3蛋白表达虽有升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与低剂量组比较,高、中剂量组LC3蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。4)Beclin-1蛋白检测：与假手术组比较,模型组及各药物干预组Beclin-1蛋白平均光密度(Mean optical density, MOD)值均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,西药组、高、中剂量组Beclin-1蛋白MOD值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；低剂量组Beclin-1蛋白MOD值虽有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与西药组比较,高剂量组Beclin-1蛋白MOD值升高,差异无统计学意义(P>0.05)。与低剂量组比较,西药组、高、中剂量组Beclin-1蛋白MOD值均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。5)海马神经元AI检测：与假手术组比较,模型组及各药物干预组AI均升高,差异有统计学意义(P<0.05)；与模型组比较,西药组、高、中剂量组AI均降低,差异有统计学意义(P<0.05)；低剂量组AI有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。与西药组比较,高剂量组AI降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。与低剂量组比较,西药组、高、中剂量组AI均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。6)血液流变学指标检测：与假手术组比较,模型组及各药物治疗干预组全血粘度、血浆粘度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各药物干预组全血粘度、血浆粘度降低,差异有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,高、中剂量组全血粘度、血浆粘度降低,差异有统计学意义(P<0.05),低剂量组升高,但差异无统计学意义(P<0.05)；与低剂量组比较,高、中剂量组全血粘度、血浆粘度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1)VD的发病过程存在自噬激活,自噬能够抑制神经元细胞凋亡。2)祛风通窍方能有效改善VD大鼠学习、记忆功能。3)祛风通窍方能够上调自噬相关蛋白LC3及Beclin-1的表达水平,有效改善细胞凋亡及血液流变学情况。4)祛风通窍方对VD的保护作用存在一定量效关系。