新生猪肌组织成纤维细胞系和耳部皮肤成纤维细胞系的建立

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本研究采用组织块培养方法成功建立了猪肌组织成纤维细胞系和耳部皮肤成纤维细胞系。通过研究分析所建立细胞系的生物学特性,以期为以后的基因功能等方面的研究提供实验材料。实验结果如下:1.对培养细胞的形态学观察的结果表明,贴壁后的成纤维细胞成明显的梭形,细胞胞质丰满,细胞核形态为卵圆形,位于胞质中央,细胞轮廓清晰。台鼢兰染色显示成活率在90%以上。2.细胞的生长曲线表明,所培养细胞的生长都经历了生长滞缓期、对数生长期和生长平台期三个阶段。生长曲线都近似呈“S”形。3.培养细胞微生物污染检测结果表明,培养的细胞没有受到任何微生物的污染。4.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学染色实验的结果表明,所培养细胞的纯度很高,其中不含有其他种类的杂质细胞。5.染色体核型分析结果表明,猪肌组织成纤维细胞和耳部皮肤成纤维细胞的染色体数2n=38,并且2n=38所占的比例分别为93.3%和83.3%,这达到了建系正常二倍体数要占75%-80%的要求。6.用双荧光素酶检测系统检测细胞的转染效率表明,所培养细胞具有较强的转染活性,可用于基因的功能等方面的研究。
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