新疆稻麦谷蛋白亚基基因的分子克隆及序列分析

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新疆稻麦(Triticum petropavlovskyi Udacz.et Migush,2n=6x=42,AABBDD)是中国特有的地方小麦品种,分布于新疆和西藏。细胞学研究的结果认为新疆稻麦有1~2条染色体与普通小麦不同。利用SDS-PAGE方法,从新疆稻麦的一份材料稻麦—2中鉴定了一对高分子量谷蛋白亚基组合1Dx2.1+1Dy10.1,这对亚基在SDS-PAGE电泳图谱中具有独特的电泳迁移率,该亚基仅在小麦的D染色体供体物种节节麦(Aegilops tauschii)有报道,而在普通小麦中没有该亚基报道。为了从分子水平对新疆稻麦的该亚基组合进行研究,对亚基基因编码区进行了克隆并测序。同时该物种的低分子量谷蛋白亚基也进行了研究。所获得的主要结果如下: 1.根据普通小麦低分子量谷蛋白亚基基因保守区序列,设计了一对引物(P1和P2),采用PCR法对新疆稻麦(Triticum petropavlovskyi Udacz.et Migusch)的基因组DNA进行扩增,获得一条约900bp的片段,纯化后克隆到载体pMD18-T后,对筛选阳性克隆测序,获得一个基因LMWXJ-1(Genbank登录号:AY695380)。序列分析的结果表明LMWXJ-1具有典型的低分子量谷蛋白亚基基因的基本结构。推导的氨基酸序列比较结果表明,LMWXJ-1与Glu-A3和Glu-D3位点的低分子量谷蛋白基因具有较高的相似性(最高相似性分别为82%和80%),而与Glu-B3位点的差异较大(最高相似性仅有68%)。 2.通过SDS-PAGE分析,表明新疆稻麦高分子量谷蛋白亚基组成包括4个表达的亚基,具体组成是:null,7+8,2.1+10.1。在SDS-PAGE图谱上,亚基2.1位于
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