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目的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)属难治性疾病,严重影响中老年人身体健康,目前病因仍然不清楚,可能与环境、遗传、老龄化等因素有关。近年来中医药治疗本病取得一定进展,但对其治疗PD的机理、作用途径等方面的研究较少。本课题通过建立帕金森病动物模型,采用免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及正电子发射断层扫描成像(PET)等方法,观察大鼠脑组织细胞形态学及分子生物学等方面的变化,评价中药补肾活血饮对帕金森病的治疗作用,并探讨其作用机理,为PD治疗提供新思路。方法将110只SD大鼠用随机数字法分为正常对照组20只及造模组90只,造模组采用右侧黑质微量注射6-OHDA的方法建立PD大鼠模型,将成功建立模型的53只大鼠随机分为中药治疗组27只及模型组26只,中药治疗组给予补肾活血饮灌胃,对照组及模型组分别给予同等剂量生理盐水灌胃治疗8周。观察治疗前后阿朴吗啡(APO)诱发大鼠偏侧旋转行为变化;分别于对照组、治疗组、模型组各随机抽取10只大鼠进行脑黑质部位酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色,观察各组大鼠TH阳性细胞数量变化,评价中药补肾活血饮对PD大鼠模型的治疗作用。于各组随机抽取1只大鼠,分别在治疗前后于尾静脉注射成像放射性示踪剂11C-β-CFT进行PET显像,观察各组大鼠脑内DAT变化情况,并运用视觉分析方法分析对照组、治疗组、模型组治疗前后显像变化。将对照组、治疗组、模型组其余9、16、15只大鼠,断头取脑,采用RT-PCR方法检测大鼠脑组织孤儿核受体(Nurrl)及乙酰胆碱毒蕈碱型受体5(M5)mRNA相对于内参基因β-actin mRNA的相对表达值。所有数据均采用CHISS统计软件进行统计学处理。结果1.中药补肾活血饮能明显改善PD大鼠的旋转行为,旋转次数与模型组比较明显减少(P<0.01)。TH免疫组化染色显示:模型组损毁侧黑质致密部TH阳性细胞数量明显减少,细胞体积缩小,与之相比,补肾活血饮治疗组黑质致密部TH阳性细胞数量明显增多(P<0.01),细胞体积增大。2.以“C-β-CFT为放射性示踪剂的PET成像显示模型大鼠脑组织损伤侧DAT下降,表现为两侧不对称。治疗后治疗组大鼠损毁侧纹状体显影显示放射性浓聚上调,与健侧基本对称,而模型组则无明显变化,仍表现为损毁侧较健侧明显稀疏。3.RT-PCR方法检测各组Nurrl及M5受体的mRNA表达的相对值比较显示:模型组明显低于对照组及治疗组(P<0.01),而对照组同治疗组之间无显著差异(P>0.05)。结论1.6-OHDA诱发法制作PD模型成功率高,模型稳定、可靠;2.补肾活血饮能够明显改善PD模型大鼠的旋转行为;3.DAT、Nurrl、M5受体、TH在帕金森的发病过程中相互作用、相互影响,最终引起脑内多巴胺减少,导致PD的发生,补肾活血饮能够促进DAT释放,增加Nurrl、M5受体mRNA表达,提高TH含量,这可能是其通过多靶点增加多巴胺含量,防治帕金森病的作用机理。