球毛壳菌(Chaetomium globosum)作为一种常见的内生真菌,具有开发为生物防治药剂的潜力,其代谢产物不仅具有广谱的抑菌活性,可以提高植物病害防控能力,还可以提高作物的产量。此外,不断从中发现新的次生代谢产物,这些化合物普遍具有良好的生物活性。因此,对球毛壳菌菌株及其代谢产物进行生物防治潜力的研究具有重要的理论意义和广阔的应用前景。本文以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、油莱菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)、辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)为测试靶标菌,筛选了 7株银杏内生真菌,结果显示一株被鉴定为球毛壳菌的菌株(菌株编号W7)抑菌活性最好。活性测试结果表明,球毛壳菌W7对油菜菌核病菌具有明显的拮抗抑菌带;100%发酵液对该病菌菌核萌发的抑制率达到87.1%;10%发酵液处理油菜菌核病菌9h后,其菌丝呼吸速率比空白对照减小了 67.86%;50%发酵液对油菜菌核病的叶片侵染防效(保护作用)达到42.21%,与阳性对照多菌灵在125 μg/mL浓度下的防效(42.52%)相当;10%发酵液对油菜种子萌发后幼苗的生长具有明显的促进作用,其根长、根鲜重、芽长、芽鲜重皆明显高于空白对照。此外还发现,除100℃加热外,60 ℃加热、紫外光照射、4℃储存29天均不会导致其发酵液对油菜菌核病菌菌丝生长抑制活性的降低,具有良好的活性稳定性。本文对该球毛壳菌的发酵液进行了分相萃取和活性测试,发现二氯甲烷相活性最好,终浓度为20 μg/mL时对油菜菌核病菌的菌丝生长抑制率达到82.1%。对该相进行化合物分离鉴定,共获得7个已知化合物,分别为flavipin(化合物1)、cheatoglobosin C(化合物 2)、cheatoglobosinB(化合物 3)、cheatoglobosinD(化合物 4)、cheatoglobosin E(化合物 5)、cheatoglobosin Vb(化合物 6)、cheatoglobosin A(化合物 7)。其中,flavipin和cheatoglobosinD的晶体结构为首次报道。活性测定结果表明,cheatoglobosin B、cheatoglobosin D对水稻纹枯病菌、草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)菌丝生长的EC50值均小于0.5 μg/mL,cheatoglobosin A对草莓灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、小麦赤霉病菌、番茄早疫病菌(Alternariasolani)、稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)的EC50值均小于0.4 μg/mL。另外,cheatoglobosin D、cheatoglobosin A对油菜菌核病的叶片侵染也具有一定的防效(保护作用),其500 μg/mL时的防效(分别为42.52%、44.94%)与阳性对照125 μg/mL时的防效(42.52%)相当。本文初步研究了球毛壳菌W7次生代谢产物flavipin对油菜菌核病菌的抑菌作用机理。结果表明,flavipin能降低该病原菌的菌丝呼吸速率,当处理时间达到12h时,其呼吸速率比空白对照下降了 68.08%;对该病原菌的线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)具有抑制作用,IC50值为33.02 μg/mL。此外,本文研究了光热处理(60 ℃,100 ℃,紫外光照射)对发酵液中3种化合物 cheatoglobosin B、cheatoglobosin D、cheatoglobosin A 含量的影响,发现加热易使cheatoglobosin B、cheatoglobosin D、cheatoglobosin A 的含量发生变化,其中cheatoglobosin B、cheatoglobosin D的含量会随着加热时间的延长而增加,而cheatoglobosinA的含量则显著减少;紫外光照处理对这3种化合物的含量影响不大,其中仅 cheatoglobosin A 的含量略有增加,而 cheatoglobosin B、cheatoglobosin D 的含量没有发生显著性变化。