紫花苜蓿内生菌的分离鉴定及特性分析

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植物内生菌种类繁多,广泛分布于多种植物的各个器官和组织中。植物内生菌通过分泌多种有益代谢物、与病原菌竞争生态位点和营养物质、诱导植物产生系统抗性等不同机制帮助植物抵抗病害。紫花苜蓿(Medicago sativa)是一种历史悠久的多年生豆科牧草,其营养丰富,含有多种必需氨基酸、稀有氨基酸和可消化蛋白,并具有耐贫瘠、抗干旱等优良特性。本研究以紫花苜蓿内生细菌为实验材料,评价其生防效果和生防特性,结果如下:1、紫花苜蓿内生细菌的分离筛选及鉴定本研究从紫花苜蓿中分离出60株内生细菌,通过平板对峙实验筛选出6株对尖孢镰刀菌有拮抗作用的菌株,根据16S r DNA序列分析、菌落形态和生理生化实验初步鉴定菌株Y1和Y5为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、G43为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、Y22为河生肠杆菌(Enterobacter amnigenus)、G62为假单胞菌Pseudomonas argentinensis、G68为霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)。2、紫花苜蓿内生细菌生防效果评价在平板对峙实验中,6株紫花苜蓿内生细菌能够不同程度地拮抗多种病原真菌;而且,6株菌株发酵液均能抑制尖孢镰刀菌菌丝及孢子正常生长,导致菌丝断裂、畸形,孢子数量明显减少;在盆栽实验中,经6株菌株处理的苜蓿病情均得到不同程度地缓解,其中,菌株Y22防效最高,为53.97%。3、紫花苜蓿内生细菌生物学特性分析本研究评价了6株紫花苜蓿内生细菌产嗜铁素能力、产HCN能力、几丁质酶活力和羧甲基纤维素酶活力。6株菌株均能产生嗜铁素和几丁质酶,菌株Y22合成嗜铁素能力最强,其相对含量为0.521,菌株G62几丁质酶活力最高,其值为0.355 IU/m L。除菌株G62外,其余菌株均能产生HCN,其中菌株G43产HCN能力最强。菌株Y1和Y5能产生羧甲基纤维素酶,其酶活力值分别为0.486 IU/m L和0.360 IU/m L。
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