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原花青素是植物王国中广泛存在的一类天然多酚类化合物,由(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素、(-)-表儿茶素没食子酸酯聚合而成。原花青素具有极强的抗氧化活性,广泛应用于医药、保健品、食品及化妆品等领域。原花青素的抗氧化活性受聚合度的影响,单体的抗氧化活性不及二聚体,聚合体的抗氧化活性随着聚合度的升高而降低,且高聚体难以被人体吸收利用。本文按聚合度大小对原花青素分级分离、对高聚体进行水解,制备高生物活性的低聚体,具有很重要的实用价值和理论意义。本文探讨了原花青素物质的量浓度测定的影响因素,确定了稳定的比色条件。以乙酸作溶剂,H2SO4为催化剂,1 mL样品水溶液+5 mL 1%香草醛+5 mL30%硫酸,30℃下避光反应15 min,测定A500。在该条件下绘制了以儿茶素为标准品的标准曲线,建立了回归方程,线性范围0.025μmol·mL-1～0.25μmol·mL-1,线性相关性良好。结合质量浓度,确定了原花青素平均聚合度测定方法。对普鲁士蓝法和水杨酸法测定原花青素抗氧化活性的条件进行了考察。普鲁士蓝法测定体系的最大吸收波长为700 nm,10 μg/mL为较适宜测定浓度,抗氧化活性以VC当量浓度表示。水杨酸法测定体系的最大吸收波长为526 nm,适宜测定浓度为 0.3 mg/mL。用10%～40%和60%乙醇溶液各2 BV对吸附在AB-8大孔树脂上的原花青素梯度洗脱以进行分级分离,洗脱液流速1BV·h-1,原花青素洗脱收率达到98.63%。分析各乙醇洗脱液中原花青素平均聚合度和抗氧化活性,0～12%乙醇洗脱液中为单体,12%～32%洗脱液中主要为低聚体,32%～60%洗脱液中为高聚体,12%～32%洗脱液原花青素抗氧化活性最高,自由基清除率为44.85%,VC当量浓度为19.38μg/mL。以平均聚合度和自由基清除率为指标,对原花青素高聚体水解工艺进行了探索与优化,亚硫酸为水解介质,样品与亚硫酸体积比1:0.1,60 ℃恒温水浴反应10 min。在该工艺条件下,原花青素高聚体的平均聚合度由7.06降至4.02,自由基清除率由8.58%升高至43.59%,有效地提高了原花青素的抗氧化活性,使原花青素资源得到充分利用。