优良榛资源组培快繁技术和叶片再生体系的进一步研究

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榛子为榛科(Corylaceae)榛属(Corylus L.)植物。榛子果仁口味佳且营养丰富,是人们最喜爱的坚果之一。随着平欧杂种榛(C.heterophylla Fisch.×C.avellana L.)的育种成功,其栽培面积在逐年增加,并且对育成品种(系)的品质鉴定也在进行。目前,已经鉴定出多个栽培表现良好的品种。例如,达维、辽榛9号和富榛4号等。达维现已成为我国榛子主要栽培品种,在市场上已经出现了苗木供不应求的现象。本研究以辽榛9号、辽榛3号、达维、84-487和富榛4号这5个品种(系)为试材,对平欧杂种榛组织培养各个阶段的技术环节进行试验,以进一步完善其组织培养快繁体系。此外,对平欧杂种榛的叶片再生体系进一步探索,希望能对今后的榛子分子生物学研究和榛子育种方向提供参考。研究结果如下:1.平欧杂种榛最佳的外植体是室内水培的茎段。最佳的消毒方式是用0.1%HgCl2消毒9 min,污染率为15%,成活率可达70%。2.达维初代培养最适培养基为NRM+0.01 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3+5.0 mg/L6-BA。富榛4号和84-487也可用此培养基培养。3.平欧杂种榛继代培养的次数过多,出现增殖系数下降现象时,添加适量的细胞分裂素TDZ能改善其增殖情况。本试验在原有的增殖培养基中加0.01 mg/L的TDZ对平欧杂种榛的增殖培养起到改善作用,增殖系数从3.37提高到5.67。4.用1/2DKW、1/2MS和1/2NRM作为生根基本培养基时的生根效率1/2NRM>1/2MS>1/2DKW。且1/2NRM培养基在诱导生根上显著优于另两种培养基。辽榛9号最适的生根培养基是1/2NRM+1 mg/L IBA+30 g/L葡萄糖+1.3 g/L PVP+6 g/L琼脂。5.水培的平欧杂种榛叶片(外植体)用0.1%HgCl2消毒的最佳时间为4 min。其污染率为7.5%,成活率达92.5%,且容易消毒。6.组培叶片和水培叶片形成愈伤组织最佳暗培养时间均为14 d。7.辽榛9号叶片的愈伤组织在NRM+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+30 g/L葡萄糖+1.3 g/L PVP+6 g/L琼脂培养基上,不定芽的诱导率可达35.56%。诱导出植株的形态与茎段培养的组培苗一致,并且诱导出的芽转接到增殖培养基中可正常生长,增殖系数可达5.17。8.本研究完善了平欧杂种榛优良资源完整的组培快繁技术体系并证明叶片再生也是资源扩繁的可行方法之一。
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