葎草质量标准及抗结核有效部位的研究

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为配合四川省科技攻关项目“四川省地方习用中药材质量标准的提高研究”本文系统研究了葎草质量控制的各项指标,并拟订了葎草质量标准草案。内容包括:来源、性状、鉴别(显微鉴别、薄层色谱鉴别)、检查(水分、总灰分、酸不溶性灰分)、浸出物测定、含量测定,其中部分内容已收入《四川省中药材标准》2008年版。同时,还进行了葎草抗结核药效物质基础的初步研究,为其进步的开发利用奠定了基础。主要研究内容及结果如下:1.本文首次对葎草进行了较为详细的形态组织学研究,,找出了其原植物、药材性状和组织构造上的主要鉴别特征。原植物形态上,主要从茎和叶柄表面的倒钩刺、叶的形状、叶表面被毛情况及腺点、雄花序及雌花序形状、花被片颜色、子房及柱头、果实等方面进行鉴别。药材性状主要主要从颜色、茎表面的倒钩刺及细柔毛、叶的形状、叶表面被毛情况及腺点、叶柄上的倒钩刺等方面进行鉴别。组织构造上,茎横切面主要从表面被毛、韧皮部外侧纤维束、各部位所占比例等方面鉴别;叶中脉横切面主要从上下表面被毛、叶肉组织分化及中脉维管束等特征进行鉴别;粉末镜检主要从纤维、非腺毛、腺毛、含钟乳体的晶细胞、草酸钙簇晶进行鉴别。2.建立了葎草中木犀草素的薄层色谱鉴别方法,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(8:2:0.5)为展开剂,分离效果好,展开后Rf值适中,色谱斑点清晰。通过对10批不同产地的对口药材及商品药材的薄层色谱试验,表明该方法对葎草中木犀草素的鉴别有较好的适应性,重现性较好。3.按照《中国药典》2010年版一部附录项下方法对10批不同产地的对口药材及商品药材进行了水分、总灰分、酸不溶灰分的检查,根据实测数据,并考虑生产实际和商品情况,制订了其限量标准:水分不得过10.09%;总灰分不得过22.0%;酸不溶性灰分不得过6.0%。4.建立了葎草的浸出物测定方法,以75%乙醇为溶剂,热浸法测定。根据10批样品的实测数据,并考虑生产实际和商品情况,拟订浸出物含量限度标准为不得低于12.0%。5.建立了葎草中木犀草素的HPLC测定方法,该方法准确度高,精密度好.操作简便、快速,可操作性强。根据10批样品的实测数据,并考虑生产实际和商品情况,拟订葎草中木犀草素含量限度标准为不得少于2.0%。6.本文首次对葎草进行了抗结核药效物质基础的研究,采用不同培养基法,对葎草进行了抗结核有效部位的筛选,发现乙酸乙酯部位有明显的抑菌作用,其最低抑菌浓度为31.25mg/ml。根据体外筛选结果,对葎草抗结核有效部位进行了化学成分分离与结构鉴定,从葎草乙酸乙酯部位分离得到4个化合物,经理化常数测定和1H-NMR、13C-NMR光谱分析,鉴定其分别为β-谷甾醇、木犀草素、p-胡萝卜苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。其中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷是首次从该植物中分离得到。
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