【摘 要】
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海绵共附生放线菌是海洋微生物的重要组成部分,其产生的次级代谢产物结构出新率高,是新药先导化合物发现的重要资源。海南岛四面环海,海绵种类繁多,为研究海绵共附生放线菌提供了丰富的材料。本论文从海南文昌海域采集海绵样品,分离其共附生放线菌、分析其菌株多样性,发现抗菌活性菌株,并探讨了活性菌株的目标次生代谢产物。其主要研究结果如下:采用四种培养基从4种海绵样品中共分离出50株海洋放线菌。依据菌落形态差异,
【基金项目】
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海南省基础与应用基础研究计划（自然科学领域）高层次人才项目（2019RC069;2019RC133）
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海绵共附生放线菌是海洋微生物的重要组成部分,其产生的次级代谢产物结构出新率高,是新药先导化合物发现的重要资源。海南岛四面环海,海绵种类繁多,为研究海绵共附生放线菌提供了丰富的材料。本论文从海南文昌海域采集海绵样品,分离其共附生放线菌、分析其菌株多样性,发现抗菌活性菌株,并探讨了活性菌株的目标次生代谢产物。其主要研究结果如下:采用四种培养基从4种海绵样品中共分离出50株海洋放线菌。依据菌落形态差异,选取22株代表性特征菌株,通过16S r RNA序列分析将所分离菌株归属于5个亚目、6个科和7个属,包括链霉菌属、小单孢菌属、红球菌属、糖多孢菌、栖白蚁菌属、分枝杆菌属和Krasilnikoviella属,其中Krasilnikoviella为首次从海绵中分离得到。抗菌活性测试显示48%的分离菌株呈现抗细菌活性,24%的分离菌株呈现抗植物丝状病原真菌活性。采用多相分类技术对5株海洋放线菌HNM0563、HNM0569、HNM0574、HNM0575、HNM0581进行了新种鉴定。菌株HNM0563和HNM0569鉴定为红球菌属的新种,分别命名为Rhodococcu spongiae sp.nov.和Rhodococcus wenchangensis sp.nov.;菌株HNM0574和HNM0575鉴定为链霉菌属的新种,分别命名为Streptomyces aquaticus sp.nov.和Streptomyces wenchangensis sp.nov.;HNM0581鉴定为小单孢菌属的新种,命名为Micromonospora marinus sp.nov.。选取新种菌株HNM0575进行大量发酵,选用八种培养基进行最佳发酵条件筛选,并对其发酵产物产物进行分析。采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱和HPLC等色谱技术从其发酵产物分离到11个化合物,通过质谱、核磁共振分析确定了三个化合物的结构,其中化合物5为Formononetin（芒柄花素）;化合物6为Daidzein（黄豆苷元）,化合物11为Oxopropaline G（β-咔啉生物碱）。抗菌活性测定显示,化合物4对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有抗菌活性。化合物6表现出对大肠杆菌的抑菌活性。
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