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新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的侵害禽类的急性、高度接触性传染病。自1926年首次暴发于印度尼西亚的爪哇岛和英国的新城以来，给养禽业带来了极大的危害，被世界动物卫生组织定为法定必报传染病。随着新城疫流行病学的变化，近年来出现了能够引起免疫鸡群发生“非典型性新城疫”及鹅、鸭发病死亡的基因Ⅶ型新城疫病毒。非典型新城疫虽死亡率不高，但会导致家禽类生产性能下降，因而对其的防治尤为重要。目前应用ND疫苗以基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主，在很大程度上控制了新城疫的流行，但对基因Ⅶ型新城疫病毒保护效果欠佳，因此研制针对基因Ⅶ型NDV的新型疫苗势在必行。DNA疫苗是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗，能同时激发体液免疫和细胞免疫，免疫持续时间比较长，具有许多其他基因疫苗无可比拟的优点，可以作为有效控制目前新城疫流行的候选疫苗之一。本研究选用分离自黑龙江省拉林地区死亡鹅的NDV Go/CH/HLJ/LL01/08毒株(基因Ⅶ型毒株，简称LL01株)，将其F，HN基因按真核表达系统优化后，分别克隆到真核表达载体pCDNA3.1R中筛选鉴定出含有F，HN基因的阳性重组质粒，分别命名为pCDNAR-F和pCDNAR-HN。将质粒转染到293T细胞，经间接免疫荧光、Western-blot检测，目的蛋白得到表达。为了检测重组新城疫病毒的F、HN DNA疫苗免疫效力，在SPF鸡上进行了动物实验。首先拟定了以下几个免疫剂量：pCDNAR-F200μg、100μg；pCDNAR-HN200μg、100μg；pCDNAR-F+pCDNAR-HN各50μg、100μg，对SPF鸡进行免疫，间隔14天，共免疫3次，末次免疫后23天，用LL01株强毒以105EID50、106EID50肌肉注射方式攻毒。结果表明，只免疫pCDNAR-F质粒及生理盐水对照的SPF鸡全部死亡，而重组质粒pCDNAR-HN50μg、100μg、200μg免疫对SPF鸡100%保护。在此基础上，又重新构建了含未经优化的F基因重组质粒pCDNAR-WF，免疫SPF鸡并攻毒，经验证与质粒pCDNAR-F相同，质粒pCDNAR-WF对鸡也没有免疫原性。重组质粒pCDNAR-HN最小免疫剂量为每次30μg，三次免疫后，用强毒株攻毒，100%保护；在上述免疫程序下，重组质粒的抗体持续期至260天，HI抗体效价值仍能达到2~4-2~5，免疫70天后，在脑、肺、心、肝、脾、肾、胃、肠、肌肉（除胸腺外）中均能检测到质粒分布。研究结果表明，所构建的重组HN基因DNA疫苗能够刺激鸡体产生高效的体液免疫反应，可抵抗致死量基因Ⅶ型NDV强毒攻击，且持续时间较长，有望作为针对基因Ⅶ型新城疫强毒的候选疫苗。