曲克芦丁对CCI模型所致神经性病理疼痛及脊髓腰膨大部炎症反应的影响

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目的:初步探讨曲克芦丁对CCI(chronic sciatic nerve construction injury)导致的神经病理性疼痛模型脊髓腰膨大部炎症反应的影响。方法:购买健康、清洁级、体重25-35g的成年雄性昆明小鼠60只,随机分为3组,分别为假手术组(Sham组,n=20)、CCI手术组(CCI组,n=20)及CCI+曲克芦丁组(曲克芦丁组,n=20)。各组小鼠均适应性喂养1周后,造模前1天分别用7370热痛仪和机械测痛仪测定各组小鼠的基础机械痛阈值和热敏痛阈值(Baseline)。Sham手术组予Sham手术处理,CCI组及曲克芦丁组予CCI手术处理,而曲克芦丁组在CCI术后7h起给予曲克芦丁150mg/kg/天灌胃处理。造模后前3天每日观察1次小鼠生活作息、觅食饮水、右后肢的姿势、步态以及局部皮肤和肌肉张力的变化变化情况,并记录是否有舔咬肢体等现象。术后1天、3天、7天、10天和14天,分别检测3组小鼠机械痛阈值和热敏痛阈值(n=5)。于术后3天(n=4)和7d(n=11),分别将三组小鼠在深麻醉状态取腰膨大部脊髓(L4-6)提取总蛋白,ELISA分别检测术后3天促炎症因子TNF-α表达,术后7天促炎症因子INF-γ和IL-1β表达,Western blot检测术后7天腰膨大部脊髓促炎症转录因子核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)(p65)表达和其磷酸化激活形式(p-p65)的表达情况。结果:1、与Sham组相比,CCI组小鼠出现明显的舔咬术侧肢体现象(P<0.05),CCI手术明显降低昆明小鼠的机械痛阈值和热敏痛阈值直至术后14天观察结束(P<0.05),即引起小鼠痛觉过敏。并且CCI术明显上调脊髓腰膨大部术后3天TNF-α,术后7天INF-γ和IL-1β表达(P<0.001),以及增强术后7天NF-κB(p65)表达和活化形式(p-p65)的表达(P<0.05)。2、曲克芦丁持续灌胃处理虽然未能明显改善明显舔咬术侧肢体现象(P>0.05),但曲克芦丁能改善CCI手术所致机械痛阈值和热敏痛阈值降低(P<0.05),即改善痛觉过敏症状,并下调CCI术所致的促炎症因子INF-γ,IL-1β和TNF-α表达(P<0.05),抑制术后7天腰膨大部脊髓NF-κB(p65)的活化与表达。结论:曲克芦丁能明显改善CCI手术所致的神经病理性疼痛症状,其机制可能与其控制脊髓腰膨大部炎症反应有关。
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