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目的:实验室前期研究显示,新橙皮苷(Neohesperidin,Neo)具有良好的降血糖和降血脂效果,具有潜在的临床应用价值。本研究旨在系统考察Neo的生殖发育毒性,包括亲代动物配子形成、交配、受孕、分娩、哺乳以及对子代生长发育等过程的不良影响,为Neo的进一步研发和应用提供实验室资料。方法:(1)Neo对大鼠生育力与早期胚胎发育的影响设置溶媒对照(5%sodium carboxymethylcellulose,5%CMC-Na)组、Neo 0.45 g/kg 组、Neo 0.9 g/kg 组、Neo 1.8 g/kg 组和环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)0.02 g/kg组,每组每性别20只。溶媒对照组和Neo 0.45、0.9、1.8 g/kg组每天灌胃给予10 ml/kg容量的相应受试物;CP 0.02 g/kg组每周皮下注射1次,孕鼠于妊娠期第3天(gestation day 3,GD3)和GD6注射,给药容量2 ml/kg。雄鼠于交配前4周开始给药至交配期结束;雌鼠于交配前2周开始给药至妊娠第6天。期间进行临床症状观察、体重和摄食量测定,雄鼠于交配期结束后处死,进行大体解剖观察、病理组织学检查和精子检测;孕鼠于GD15处死,进行大体解剖观察、病理组织学检查和子宫内容物检查。(2)Neo对大鼠胚胎-胎仔发育的影响设置溶媒对照(5%CMC-Na)组、Neo 0.45 g/kg 组、Neo 0.9 g/kg 组、Neo 1.8 g/kg组和CP 0.012 g/kg组,每组至少20只孕鼠。溶媒对照组和Neo 0.45、0.9、1.8 g/kg组于GD6至GD15每天灌胃给予10 ml/kg容量的相应受试物;CP 0.012 g/kg组于GD12进行皮下注射,给药容量2 ml/kg。期间进行临床症状观察、体重和摄食量测定,GD20处死孕鼠,进行大体解剖观察、子宫内容物检查以及胎仔外观、骨骼和内脏检查。(3)Neo对大鼠围产期的影响设置溶媒对照(5%CMC-Na)组、Neo 0.45 g/kg 组、Neo 0.9 g/kg 组、Neo 1.8 g/kg组和CP 0.012 g/kg组,每组至少20只孕鼠。溶媒对照组和Neo 0.45、0.9、1.8 g/kg组孕鼠于GD15至子代出生后第21天(Postnatal day 21,PND21)每天灌胃给予10ml/kg容量的相应受试物;CP0.012 g/kg组于GD15、PND1、PND6、PND12、PND18进行皮下注射,给药容量2 ml/kg。期间对孕鼠或母鼠进行临床症状观察、体重和摄食量测定,PND21处死。子一代(First filial generation,F1代)进行临床症状观察、体重和摄食量测定和生长发育检查,包括体格发育、神经反射功能、四肢运动行为、平衡与协调能力、自主活动、学习和记忆能力、生殖功能检查、病理组织学检查等。结果:(1)Neo对大鼠生育力与早期胚胎发育的影响雄性动物给予0.02 g/kg CP后,动物临床症状、体重、摄食、精子活力、精子计数以及生殖器官均未见明显毒性反应,但精子畸形的异常发生率明显升高。雌鼠给予0.02 g/kg CP后,对雌鼠着床前阶段黄体生成、着床过程影响较小,但对于着床后胚胎发育过程有显著的毒性作用。SD大鼠给予Neo 0.45、0.9、1.8 g/kg后,临床症状观察、体重、摄食、妊娠期增重、生殖系统功能、交配行为、生育力、早期胚胎发育等均未见明显毒性反应。(2)Neo对大鼠胚胎-胎仔发育的影响GD12皮下注射0.012 g/kg CP,孕鼠于GD15开始的体重减轻,该变化与子宫重、胎仔重量、胎仔大小相关指标变化一致;同时,胎仔的外观检查、内脏检查和骨骼检查中均可见明显毒性反应。孕鼠于GD6-GD15给予Neo后,均未见明显的母体毒性反应;对胚胎-胎仔的主要毒性影响为延缓顶骨、第六胸骨骨化,可能影响下颌骨、颈椎、腰椎、耻骨、枕骨、第一胸骨、第三胸骨、第四胸骨的骨化程度、肋骨骨化形态以及脑部和食管发育。(3)Neo对大鼠围产期的影响亲代母鼠给予CP后,主要的母体毒性为产后的体重摄食下降,;CP对于F1代动物的存活、体格发育、平衡协调能力、生殖系统器质性及功能均可能有一定的毒性影响。亲代母鼠给予0.45、0.9、1.8 g/kg的Neo后,体重、摄食、分娩以及哺乳情况均未见明显改变;CP对F1代动物的存活、体格发育、神经反射功能、四肢运动功能、平衡协调能力、自发活动检查、学习和记忆能力以及生殖功能方面均未见明显毒性。结论:在本试验条件下,SD大鼠灌胃给予0.45、0.9、1.8 g/kg剂量Neo后,对生育力与早期胚胎发育以及围产期未见明显毒性反应,对胚胎-胎仔的发育具有一定的毒性反应,主要毒性可能为延缓骨骼骨化以及影响脑和食管发育。