罗库溴铵(Rocuronium Bromide Bromide)是新型中效非去极化肌松药，该药起效快且体内无蓄积作用、对心血管系统抑制作用弱、不升高眼内压和颅内压、无类过敏反应、对组胺释放小。除了能提供与琥珀胆碱相似的插管条件外，也适用于颅脑手术，眼科急诊手术及肾功不全患者的麻醉，是目前最好的肌松药。　　 对药品进行质量控制是保证药品安全有效的基础和前提，为达到质量的有效控制，需要从多角度、多层面来控制药品质量。本研究建立了罗库溴铵及其制剂的质量标准，并对其分析方法进行了科学性、准确性和可行性评价，对确保产品的质量稳定与安全有效具有重要意义。　　 主要研究分为三部分：　　 1.罗库溴铵结构确证　　 目的：对新合成的罗库溴铵进行结构确认，确保目标产物的正确性，以保证药学、药理、毒理和临床等各项研究顺利进行。　　 方法：采用紫外吸收光谱(UV)、红外吸收光谱(IR)、高分辨率质谱(HRMS)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、X-射线粉末衍射(X-RPD)及差示扫描量热(DSC)等分析测试方法得到的相关数据进行结构确证及综合解析。　　 结果：采用紫外吸收光谱(UV)、红外吸收光谱(IR)、高分辨率质谱(HRMS)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、X-射线粉末衍射(X-RPD)及差示扫描量热(DSC)等分析测试方法确定供试品与罗库溴铵结构一致。　　 结论：新合成的化学物质为罗库溴铵。　　 2.罗库溴铵质量标准的方法学研究　　 目的：研究罗库溴铵的性状、鉴别、检查、含量测定等方法，为其质量标准的制定提供理论依据。　　 方法：(1)性状：对外观、引湿性、溶解度、熔点及比旋度进行测定。(2)鉴别：分别采用化学法、红外分光光度法对其进行鉴别。(3)检查：按照《中国药典》（2010年版）二部附录一般杂质的检查法对本品的酸碱度、溶液的澄清度与颜色、水分、炽灼残渣、重金属、砷盐等进行检查：有关物质采用高效液相色谱法测定；有机溶剂残留量对甲醇、正戊烷、乙醚、丙酮、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸异丁酯的残留量进行考察。(4)含量测定：采用容量法中非水酸碱滴定法测量本品含量。a．溶液稳定性：取样品溶液分别放置4小时后测定样品含量并计算RSD值。b．灵敏度试验：将预馈值改为0ml，逐步减小罗库溴铵的称样量，对样品进行滴定，观察滴定终点突跃，检测该法灵敏度。c．重复性试验：精密称取罗库溴铵各6份约0.35g，分别置于滴定杯中，照含量测定项下方法测定并计算RSD值。d.中间精密度试验：取同一批样品，由3名不同试验者在不同时间内、采用不同厂家的色谱柱，测定罗库溴铵的含量并计算RSD值。e．回收率试验：精密称取罗库溴铵对照品约0.28g、0.35g、0.42g（分别相当于测定浓度的80％、100％、120％）各三份按含量测定项下方法测定并计算回收率。f．依据上述含量测定方法，测定罗库溴铵含量。　　 结果：(1)性状：罗库溴铵为类白色粉末，无臭，具有引湿性；在三氯甲烷中极易溶，在N，N-二甲基甲酰胺、无水乙醇、水、乙腈中易溶，在乙醚中几乎不溶；熔点161～169℃；比旋度+28.5°～+32.0°(0.1mol/L盐酸溶液)；(2)鉴别：采用化学法用以鉴别溴离子，反应生成淡黄色凝乳状沉淀，沉淀在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶；红外光谱中供试品与对照品吸收光谱一致；高效液相色谱图中供试品溶液主峰和对照品溶液主峰保留时间一致。(3)检查：依法对酸碱度、溶液的澄清度与颜色、水分、炽灼残渣、重金属、砷盐等一般杂质进行检查均符合规定；有关物质采用高效液相色谱法进行测定。a．系统适用性：理论板数按罗库溴铵峰计算应不低于7000。b．检测波长定为207nm。c．专属性试验：罗库溴铵经热、酸、碱、氧化、强光破坏后，所产生的降解产物与主成分的峰完全分离，说明该方法专属性强。d．灵敏度：采用逐步稀释法测定，以S/N=3时，罗库溴铵及杂质Ⅰ～V的检测限，分别为18、12、19、18、20、11ng。e．有关物质及残留溶剂的结果均符合规定。(4)含量测定：采用非水酸碱滴定法测定本品的含量。a．溶液稳定性：本品在4小时内稳定且RSD0.03％。b．线性相关性考察：回归方程：V=16.3326W-0.0016(r=0.9999)，表明罗库溴铵在0.1501g～0.4013g范围内线性关系良好。c．灵敏度：1.71mg。d．重复性试验：平均含量为99.7％，RSD为0.1％。表明该方法的重复性良好。e．中间精密度试验：取同一批样品，由3名不同试验者在不同时间内测定罗库溴铵的含量，结果平均含量为99.7％，RSD为0.2％，结果表明，本方法中间精密度良好。f回收率试验：精密称取罗库溴铵对照品约0.28g、0.35g、0.42g(分别相当于测定浓度的80％、100％、120％)各三份按含量测定项下方法测定并计算回收率，样品的回收率分别为99.9％、100.0％、100.0％;RSD为0.1％。依据上述含量测定方法，罗库溴铵含量为分别为：99.8％，99.6％，99.9％。　　 结论：通过对罗库溴铵的性状、鉴别、有关物质及含量测定方法的全面研究，建立了一整套操作简便、灵敏度高、结果准确的药物分析方法，为罗库溴铵质量标准的建立提供了科学的依据。　　 3.罗库溴铵注射剂的质量标准研究　　 目的：通过对罗库溴铵注射液的性状、鉴别、杂质检查、含量测定及配伍试验的研究，为其质量标准的制定提供理论依据。　　 方法：(1)性状：采用目视法对罗库溴铵注射液的外观性状进行了测定。(2)鉴别：分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法对其进行鉴别。(3)杂质检查：按照《中国药典》（2010年版）二部附录注射剂通则中一般杂质检查法对本品的pH值、溶液的澄清度与颜色、可见异物、不溶性微粒等进行检查；有关物质采用高效液相色谱法测定；(4)含量测定：采用高效液相色谱法。a．溶液稳定性：取样品溶液放置24小时后测定样品主峰峰面积并计算RSD值。b．线性相关性考察：配制一系列浓度的罗库溴铵对照品溶液，测定峰面积：以罗库溴铵的含量为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，制备标准曲线。c．定量限：将罗库溴铵对照品溶液逐步稀释，当信噪比S/N≥10，此时浓度即为定量限。d．重复性试验：取罗库溴铵注射液按含量测定方法平行制备样品溶液6份，分别测定含量并计算RSD值。e．回收率试验：精密称取罗库溴铵对照品，分别置于50ml量瓶中，按处方配制样品溶液，用流动相溶液配制成测定浓度的80％、100％、120％的溶液各三份，按已确定的色谱条件进行分析，计算回收率。g．样品测定：按已确定方法，测定罗库溴铵注射液含量。　　 结果：(1)罗库溴铵注射液为微黄色的澄明液体；(2)鉴别：TLC鉴别试验表明供试品溶液所显示主斑点的位置、颜色、大小与罗库溴铵对照品溶液相同；HPLC法色谱图中供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰保留时间一致。(3)检查：依法对pH值、溶液的澄清度与颜色、可见异物、不溶性微粒等一般杂质进行检查均符合规定；有关物质采用高效液相色谱法进行测定。a．系统适用性：理论板数按罗库溴铵峰计算应不低于7000。b．分离度：主峰与相邻杂质、辅料、溴分离度良好。c．专属性试验：空白试验表明辅料及溶剂均不干扰测定；另将供试品经热、酸、碱、氧化、强光破坏后，所产生的降解产物也均与主成分峰完全分离，说明该方法专属性强。d．重复性试验：杂质Ⅲ的平均含量为0.2％，RSD为1.5％；其他杂质均未检出，可见该方法重复性良好。e．溶液稳定性：供试品溶液在12小时内稳定。(4)含量测定：a．溶液稳定性：本品在24小时内稳定，其RSD为0.6％。b．线性相关性考察：回归方程：A=1951.63C+19.58，r=0.9999。表明罗库溴铵在0.2008～2.006mg/ml浓度范围内线性关系良好。c．定量限为：20.1ng。d．重复性试验：平均含量为99.7％，其RSD为0.4％。e．回收率试验：精密称取罗库溴铵对照品，分别置于50ml量瓶中，按处方配制样品溶液，用流动相制成测定浓度的80％、100％、120％的样品溶液，按含量测定项下色谱条件进行分析，计算回收率，样品的平均回收率分别为99.7％，99.8％，99.9％;RSD值为0.1％。结果表明，该方法回收率良好。f．依据上述方法测定三批罗库溴铵注射液含量，结果分别为99.2％,99.5％,99.1％。　　 结论：通过对罗库溴铵注射液的性状、鉴别、有关物质及含量测定方法的全面研究，建立了一整套操作简便、灵敏度高、专属性强、结果准确的药物分析方法，为罗库溴铵注射液质量标准的建立提供了科学的依据。