前列腺癌是威胁人类生命的恶性肿瘤之一，其发病率在我国近年来明显升高，对它的诊治已日益受到重视。UROC28基因在前列腺癌、膀胱癌及乳腺癌中高表达，并随着前列腺肿瘤Gleason分级的增高而表达升高，在与正常人、BPH患者相比较发现前列腺癌患者血清中UROC28基因蛋白呈高表达，人们预测UROC28基因可能在前列腺癌变过程中发挥着重要作用，其有可能成为与PSA类似的前列腺癌诊断的特异性标志物，为前列腺癌的早期诊断、判断预后及基因治疗提供有意义的帮助。 蛋白质问的相互作用存在于机体每个细胞的生命活动过程中，它们都控制着大量的细胞活动事件，是生命活动的基础，一切生命活动几乎都是通过蛋白质之间的相互作用而实现的。对生命活动过程中蛋白质作用的研究有助于揭示生命过程的许多本质问题。 UROC28是一个新基因，对它的相关研究很少。为对其机理和功能做 第四军医大学博土学位论文5 些尝试性的探索，实验首先分别从膀脐癌组织和前列腺癌PC－3细胞系中 提取总RNA，通过针对UROC28基因设计的两条引物，RT－PCR扩增出CDNA， 分别克隆入载体PUC19和PGBKT7，测序证实得到与文献报道一致的目的 片段，同时构建于GST融合表达载体中，SDS－PAGE和Western Blot证实 表达的融合蛋白分子量约42KD，为包涵体，获得的重组蛋白将用作抗原 产生抗体，为进一步研究UROCZS蛋白的组织分布、功能和特性等奠定了 基础。 为了寻找与UROCZS基因相互作用的分子或新的配体，我们应用酵母 双杂交技术筛选了胎肝和胎脑cDNA文库，将构建于DNA亿D的h乙载体 克隆入酵母菌株 AH刁 中。通过表型自激活检测以及p－半乳糖昔酶检测 排除了诱饵蛋白的自激活功能。通过筛选文库，我们得到了38个与URot28 基因相互作用的侯选基因，对这些基因将进行深入分析，为UROC28基因 的进一步研究作了前期的基础性工作。