【摘 要】
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目的:本研究探讨OVOL2蛋白及其下游相关因子MAP3K8及CXCL16在结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）中的功能和临床实践意义。方法:我们用RNA转录组测序（RNA-Seq）对过表达OVOL2的HCT116细胞系和沉默OVOL2的SW480细胞系进行测序,测定差异性表达基因（DEGs）。应用交叉染色质免疫沉淀测序法（ChiP-Seq）测定相关峰（Peaks）,验证相关因子的
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目的:本研究探讨OVOL2蛋白及其下游相关因子MAP3K8及CXCL16在结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）中的功能和临床实践意义。方法:我们用RNA转录组测序（RNA-Seq）对过表达OVOL2的HCT116细胞系和沉默OVOL2的SW480细胞系进行测序,测定差异性表达基因（DEGs）。应用交叉染色质免疫沉淀测序法（ChiP-Seq）测定相关峰（Peaks）,验证相关因子的相互作用。在体外细胞实验中,我们对结直肠癌细胞系进行了划痕实验和细胞迁移侵袭实验,验证敲减前后细胞表型变化,并应用免疫印迹实验验证相关因子表达水平继而验证相关信号通路及分子相互作用机制。同时,我们对结直肠癌病人的癌和癌旁组织应用免疫印迹实验和免疫组化以及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）进行评估,主要评估了 OVOL2及其相关的有丝分裂蛋白激酶激酶激酶（MAP3K8）和C-X-C基序的趋化因子16（CXCL16）的RNA表达（n=597）水平及蛋白表达（n=93）水平,并进行生存和预后相关指标分析。我们还对培养的细胞上清液和29例结肠息肉患者及24例结直肠癌患者的血清样本进行ELISA测定,测定它们中的CXCL16的表达水平。结果:研究发现,OVOL2通过阻断MAP3K8/AKT/NF-κb信号通路抑制CRC细胞的迁移和上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）,并降低MAP3K8/AKT/NF-κ b信号通路下游CXCL16的水平。此外,与邻近的正常组织相比,患者的肿瘤组织样本中OVOL2的表达量较低,而CXCL16表达水平较高。生存分析显示,OVOL2和CXCL16表达高低与总生存期（OS）相关,是CRC的独立预后因素。相关数据分析还表明,OVOL2和CXCL16两者联合检测对预后判断更有价值,CXCL16有可能作为CRC潜在的诊断性生物学标志物和预后判断指标。结论:OVOL2/MAP3K8/CXCL16轴在结直肠肿瘤发生和转移中起关键作用,CXCL16可能是循环中一个潜在的结直肠肿瘤诊断和预后相关的生物学标志物。
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